13-酶抑制法在农残检测中的应用接及乙酰胆碱酯酶的研究进展.pdfVIP

%) 《食品研究与开发》 年 月第 卷第 期 !# ! !$ % 酶抑制法在农残检测中的应用及 乙酰胆碱酯酶的研究进展 温艳霞 李建科 陕西师范大学食品科学系 %$! 摘 要：论述了乙酰胆碱酯酶用于有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测的原理和方法，总结了目前国内外进行的乙 酰胆碱酯酶的分离纯化工作，并对各种纯化方法的纯化效果进行了比较。 关键字：乙酰胆碱酯酶；农药残留；原理分离纯化 ! #$ 近年来，食品安全问题已经严重威胁着人类 *+,-* . /-* -* ++--* , 乙酰胆碱.0* + ) ) ! ! ) ! 的健康，而果蔬中由于过量使用或滥用农药而导 *+,-* . /-* -* +*,胆碱.0-* -++* ) ) ! ! ) 致的农药残留及其急慢性中毒已经引起了社会的 同时胆碱酯酶被乙酰化，成为乙酰化胆碱酯 高度重视。目前，我国常用的有机磷，氨基甲酸酯 酶，在几千分之几秒内立即水解成为乙酸和胆碱 类农药如甲胺磷，对硫磷，马拉硫磷，乐果等几十 酯酶，后者又重新作用于乙酰胆碱。有机磷、氨基 种高毒农药占总农药用量的’ 以上，大部分不 甲酸酯类农药进入机体以后则与胆碱酯酶结合 溶于水，溶于有机溶剂，在中性和酸性条件下稳 形成了不易水解的磷酰化胆碱酯酶，丧失了水解 ［］ 定，不易水解，在碱性条件下易水解而失效 % 。这 乙酰胆碱的活力，如果大多数胆碱酯酶都转变为 些有机磷，氨基甲酸酯类农药都是通过抑制胆碱 相当稳定难以水解的磷酰化胆碱酯酶，乙酰胆碱 酯酶的活性使组织中乙酰胆碱不能分解而过量蓄 就在体内大量蓄积产生迟发性神经毒性使中枢 积，使一系列以乙酰胆碱为传导介质的神经处于 神经、交感神经、运动神经和一些腺体首先兴奋 过度兴奋，最后转入抑制和衰竭而引起轻重不等 而活动增强，引起运动失调等，最后转入抑制和 ［］ ［］ 的中毒 ! 。 衰竭、瘫痪甚至中毒死亡 1 。有机磷农药可通过 目前农药快速检测常用的方法是酶抑制法，利 消化道摄入，也可通过皮肤黏膜、呼吸道吸收而 用这一原理生产的各种速测卡、速测仪，由于其高 中毒。 度的专一性、灵敏性和准确性，正在广泛用于果蔬 酶抑制法检测农产品中有机磷及氨基甲酸 生产基地以及监督部门。检测用酶则是决定检测灵 酯类农药残留是根据有机磷农药的毒理特性对 敏度的关键因素，酶的分离纯化成为目前研究的