中国药科大拟学药物代谢动力学实验考查知识点整理.docVIP

药物代谢动力学实验考查知识点整理 第一部分：HPLC使用注意事项 1、HPLC组成：泵、进样器、色谱柱、检测器、数据系统/积分仪 2、反相色谱： 分离机理：“反相色谱”固定相极性小于流动相极性 常用流动相：乙腈、甲醇，水 3、色谱柱的分类： 按填料：球形、无定形 按含碳量：C18、C8 按应用：分析柱、制备柱、预处理柱 按粒径：150mm*4.6mm,5μm等 按填料类型：正相柱、反相柱、手性柱 4、键合相色谱柱的优缺点： 优点：稳定不易流失； 应用广泛，可使用多种溶剂； 消除硅羟基的不良影响； 缺点：pH得在3~8范围内 5、C18柱的活化：90% 10% 90%的甲醇溶液1ml/min依次冲洗30min 6、流动相： 使用之前需超声脱气（PPT18） 目的：色谱泵输液准确 提高检测性能 保护色谱柱 流动相脱气的方法：加热，抽真空，超声，通惰性气体 流动相组成： 流动相配置： 缓冲溶液现用现配，不要储存时间过长，避免pH值发生变化和成分分解，影响色谱分离的效果 有机溶液和缓冲液使用前均需经0.45μm微孔滤膜过滤； 流动相使用前脱气。 7、常用定量方法： 外标法 内标法（准确麻烦）