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G K Western Blot 点滴 章春荠 2015.05 南京凯基生物科技发展有限公司 原理 结构 western blot 点滴 试剂 步骤 仪器 蛋白提取 膜再生 蛋白定量 显 色 凝胶电泳 曝 光 转 膜 二抗孵育 封 闭 一抗孵育 WesternBlot Overview 1 蛋白提取 则 略 原 策 的 取 取 提 提 的 白 同 蛋 不 白 蛋 的 同 不 1.标准化，具备重现性，操作简便。 原则 2.蛋白处于溶解状态，不被降解、不发生化学修饰。 3.抽提完全。 4.必要时去除某些高丰度蛋白和核酸的干扰。 提取 提取策略的选择依循所要提取的蛋白分布、溶解 策略 性、样品性质及下游进行的实验。 蛋白提取 原理 方法步骤 仪器试剂 白 蛋 蛋白提取案例1 总 裂解样品 离心收集 定量检测 丰田召回门 的发生 细胞加入裂 细胞加入裂 高速离心收 蛋白定量 高速离心收 蛋白定量 解液冰上放 解液冰上放