玻璃器皿的洗涤、包扎、干同燥及灭菌.pdfVIP

实验一、玻璃器皿的洗涤、包扎、干燥及灭菌 一、目的要求 1、掌握实验室常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎方法。 2 、了解湿热和干热灭菌的原理,并掌握有关的操作技术。 二、原理 为确保实验顺利地进行,要求把实验所用的玻璃器皿清洗干净并干燥，微生物实验还要 进行灭菌。为保持灭菌后和无菌状态，需要对培养皿，吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等 加塞棉塞。 这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不安操作规定去做，则会影响实验结果， 甚至会导致试验的失败。 1、玻璃器皿的清洗 ①不能用有腐蚀作用的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿；新的玻 璃器皿应用 2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分洗干净。 ②用过的器皿应立即洗涤。 ③强酸，强碱，琼脂等能腐蚀，阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须到在废物缸内。 一般的器皿都可用去污粉，肥皂或配成 5%的热肥皂水来清洗。油脂很重的器皿应先将油脂 擦去。沾有煤膏，焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或 40%氢氧化钠或用洗液浸泡；沾有 蜡或油漆物，可加热使之熔融后揩去，或用有机溶剂(苯，二甲苯，汽油，丙酮，松节油等) 揩去。 ④洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀湿润而无条纹和水珠。 2 、器皿包扎 为了灭菌后仍保持无菌状态，各种玻璃器皿均需包扎。 3、干燥 做实验应经常要用到的仪器应在每次实验完毕后洗净干燥备用。用于不同实验对干燥有 不同的要求，一般定量分析用的烧杯、锥形瓶等仪器细净即可使用，而用于精密分析的仪器 很多要求是干燥的，有的要求无水痕，有的要求无水。应根据不同要求进行干燥仪器。 （1 ）、烘干 洗净的仪器控去水分，放在烘箱内烘干，烘箱温度为 105~110℃烘 1 小时左右。也可放 在红外灯干燥箱中烘干。此法适用于一般仪器。称量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷却和保 存。带实心玻璃塞的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以免破裂。量器 不可放于烘箱中烘。硬质试管可用酒精灯加热烘干，要从底部烤起，把管口向下，以免水珠 倒流把试管炸裂，烘到无水珠后把试管口向上赶净水气。 （2 ）、热（冷）风吹干 对于急于干燥的仪器或不适于放入烘箱的较大的仪器可用吹干的办法。通常用少量乙醇、 丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的仪器中摇洗，然后用电吹风机吹，开始用冷风吹 1~2 分钟，当大部分溶剂挥发后吹入热风至完全干燥，再用冷风吹去残余蒸汽，不使其又冷 凝在容器内。 （3 ）、晾干 不急等用的仪器，可在蒸馏水冲洗后在无尘处倒置处控去水分，然后自然干燥。可用安 有木钉的架子或带有透气孔的玻璃柜放置仪器。 3、灭菌 灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。 本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。通过加 热使菌体内 蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白质的凝固变性与其自身含水量有关， 含水量越高，其凝固所需要的温度越低。在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，因为在 湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强，可增加灭菌效力。 （1 ）、湿热灭菌 ①煮沸消毒法： 注射器和解剖器械等均可采用此法。先将注射器等用纱布包好，然后放进 煮沸消毒器内加水煮沸。对于细菌的营养体煮沸约 15 ～30min ，对于芽孢则需煮沸约 1 ～2h 。 ②高压蒸汽灭菌法： 高压蒸汽灭菌用途广，效率高，是微生物学实验中最常用的灭菌方法。 这种灭菌方法是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到 1.05kg/cm2 时，水蒸气的温度升高到 121℃，经 15 ～30min ，可全部杀死锅内物品上的各种 微生物和它们的孢子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和工作服等都可应用此 法灭菌。 （2 ）、干热灭菌 通过使用干热空气杀灭微生物的方法叫干热灭菌。一般是把待灭菌的物品包装就绪后，放 入电烘箱中烘烤，即加热至 160 ～170℃维持 1 ～2h 。干热灭菌法常用于空玻璃器皿、金属器 具的灭菌。凡带有胶皮的物品，液体及固体培养基等都不能用此法灭菌。 三、实验仪器药品 1、培养皿，吸管，试管，三角瓶，试管刷，棉花，报纸、包扎绳、去污粉等。 2 、电热鼓风干燥箱、立式高压蒸汽灭菌锅。 四、实验步骤与注意事项 1、洗涤 ①用试管刷蘸取少量去污粉反复刷洗器皿 2~3 次。 ②用自来水冲洗 2~3 次。 ③用少量去离子水荡洗 1~2 次，控干水分。 2 、器皿包扎 ①培养皿：洗净的培养皿烘干后每 5 套(