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莱氏野村菌产孢培养基的正交优化设计 　　摘要：研究不同碳源和氮源??莱氏野村菌[Nomuraea rileyi （Farlow） Samson]培养性状的影响，并筛选出产孢能力最强的培养基。以SMAY为基础培养基，分别更换碳源和氮源，研究培养性状的差异；采用正交试验对碳源和氮源含量进行优化。结果表明，不同碳源对莱氏野村菌有不同的作用，单糖类碳源有利于产孢，多糖类碳源有利于菌落生长，最有利于产孢的碳源是葡萄糖；酵母提取物是最有利于莱氏野村菌产孢的氮源，蛋白胨是最有利于菌落生长的氮源，蚕蛹粉与酵母提取物联合使用对产孢能力有增效作用。最有利于莱氏野村菌产孢的培养基组成为葡萄糖0.4%+酵母提取物1.6%+蚕蛹粉0.4%。 　　关键词：莱氏野村菌[Nomuraea rileyi （Farlow） Samson]；正交试验；产孢培养基 　　中图分类号：Q939.95 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）23-6164-05 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.23.040 　　Abstract：The effects of different carbon and nitrogen sources on the cultural characteristics of Nomuraea rileyi were studied， and the best media for the sporulation was screened out. Taking SMAY as basic media， the different cultural characteristics of N. rileyi was compared by replacing different carbon and nitrogen sources， and the best combination of carbon and nitrogen by orthogonal test was screened out. The results showed that different type of carbon source has the different effect on N. rileyi. Monosaccharide is beneficial to the sporulation， while polysaccharide is suitable for the colony growth， and the best carbon source for sporulation is glucose. As nitrogen source， yeast extracts is the best nitrogen to the sporulation， while peptone is good to the colony growth. There is a significant synergism effect when yeast extracts combined with silkworm pupae powder. The best media for the sporulation of N. rileyi is glucose 0.4%+yeast extracts 1.6%+silkworm pupae powder 0.4%. 　　Key words： Nomuraea rileyi； orthogonal design； cultural media； sporulation 　　莱氏野村菌[Nomuraea rileyi （Farlow） Samson]是一种全世界广泛分布的昆虫病原真菌（entomopathogenic fungi），对多种农业害虫都有很好的控制作用，尤其对鳞翅目夜蛾科害虫具有更强的寄生能力[1]。相较于另外两种被广泛应用的虫生真菌金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）和球孢白僵菌（Beauveria bassiana），N. rileyi更容易在田间引起害虫疾病的流行，因而在自然环境中经常能发现被莱氏野村菌感染死亡的罹病虫体。在温度、湿度适宜的条件下，N. rileyi可有效降低害虫的种群数量，国外已有多次应用成功的报道[2，3]。相对而言，中国对N. rileyi的开发利用依然较为薄弱。 　　大部分真菌的研究工作都需要对真菌进行室内人工培养，且不同真菌对培养基的养分组成要求差异较大。培养N. rileyi一般采用萨氏麦芽糖酵母琼脂培养基（Sabouraud maltose agar supplement