微生物限度检查室浮游菌测试操作规程.docVIP

微生物限度检查室浮游菌测试操作规程 一、范围：本标准规定了微生物限度检查室浮游菌的测试方法和要求； 适用于本公司浮游菌的测试。 二、引用标准：GB/T-16293-1996，GMP（1998年修订）附录，中国药典2000年版二部。 三、浮游菌测定的标准： 洁净度级别 法定标准 活微生物数/m3 100 ≤5 10,000 ≤100 四、仪器、设备和培养基 1、所用的仪器、设备和培养基 1.1 浮游菌采样器 1.2 真空抽气泵 1.3 培养皿（φ150mm×15mm） 1.4 培养皿（营养琼脂培养基） 1.5 恒温培养箱 2、仪器、设备、培养基的要求 2.1 浮游菌采样器 2.1.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时量。 2.1.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。 2.1.3 采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性，检验项目有：定时器，转盘转速，流量计。 2.1.4 每次测试前应先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计和定时器。 2.1.5 空气采样量根据需要选定，已知采样器的流量（L/min），设定采样时间（nin）两者相乘即采样量（ L）。 2.1.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，尽量减少弯曲。 2.2 真空抽气泵 2.2.1 真空抽气泵的排气量应与采样器匹配。 2.2.2 宜采用无油真空抽气泵，必要时可在排气口安装气体过滤器。 2.2.3 真空抽气泵安装的位置一般装在采样器下面。 五、测试方法 1、测试有仪器、培养皿表面必须严格消毒。 1.1 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌，用于100级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内。 1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。 1.3 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盘，转盘以及罩子的内外面，采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 1.4采样口及采样管，使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对采样管的外壁外内壁进行消毒，应将管中的残留液倒掉并晾干。 1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。 2、采样程序 2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并调好流量，转盘转速。 2.2 关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样吕缝隙高度。 2.3 置采样口于采样点后，开启采样器、转动定时器，根据采样量设定采样时间。 3、培养 3.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中30~35℃培养48h。 3.2 每批培养基可选3只培养皿作对照培养，检验培养基本身是否污染。 4、菌落计数 4.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5~10倍放大镜检查，有否遗漏。 4.2 若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 5、注意事项： 5.1 使用前应检查每个培养皿的质量，培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。 5.2 采用一切措施防止采样管的污染或其他人为对样本的污染。 5.3 对培养基，培养条件及其他参数作详细的记录。 六、测试规则 1、测试状态 1.1 浮游菌测试前微生物限度检查室的温、温度必须达到规定的要求，换气次数，空气流速必须控制在规定值内。 1.2 浮游菌测试前，微生物限度检查室已经过消毒。 1.3 测试状态为静态测试，并在报告中注明测试状态。 2、测试人员 2.1 测试人员必须穿戴符合环境级别的工作服。 2.2 静态测试时，室内人员不得多于2人。 3、测试时间： 3.1 对单向流，如100级净化工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min 后开始。 3.2 对非单向流，如缓冲室、培养室，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。 4、最少采样点数目及其布置，最小采样量，见下表 区域 面积（m2） 洁净度级别 最少采样点 最小采样量（L/次） 验证 监测 环境验证 日常监测 净化 工作台 0.8 100 2~3 1 1000 600 微生物限度检查室 4.8 100,000 2 1 500 400 采样点的布置，见“质检微生物限度检查室悬浮粒子测试操作规程（5.4.1）”。 4.1 对每个100级净化操作台，可在离药物敞开口处30cm处设测点，每班一次。 4.2 对每个1000级洁净工作区或可在工作面处设测点，每班一次。 4.3 采样点位置可以同悬浮粒子测试点，工作区测点位置离地0.8m~1.5m左右，（略高于工作面）；送风口测点位置离开送风面30cm左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。 4.4 每个采样点一般采样一次。 4.5 对于单向流或送风口，采样器采样管口