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天然抑菌物质制成洗手液步骤
2.2 实验原料的来源
迎春花于2014年3月12日采自安阳工学院德馨园内。
2.3 天然活性成分的精制
2.3.1 迎春花的预处理
常温下,先将迎春花花上的绿帽摘掉,晾干或45℃烘干,粉碎。
2.3.2 迎春花的提取
向烧杯中加入60%乙醇溶液600mL浸泡,并用塑料袋罩住烧杯口,放置24小时;取出滤液再用离心机2000离心20分钟,滤去沉淀即可得到精制无杂质的迎春花花提取液。
方法:以抑菌效果为指标,在单因素试验的基础上,确定提取溶剂的体积分数、提取温度和提取时间进行4因素3水平正交试验
2.4 洗手液的配制
将原料按照配方顺序溶解,搅拌,静置36小时。装瓶。
1洗手液的配置
(1)预配置
用电子天平称取0.36g柠檬酸和2.38g柠檬酸钠于50mL的烧杯中,加蒸馏水搅拌溶解,用玻璃棒转移到100mL容量瓶中定容至刻度,为6;同样取0.79g柠檬酸和1.74g柠檬酸钠溶解定容于100mL容量瓶中,为5。作为调节剂。
(a)取50g蒸馏水于100mL烧杯中,加羧甲基纤维素调节其粘度,称得纤维素为30g,测定溶液的为13,呈强碱性。
(b)取100mL蒸馏水于200mL烧杯中,加琼胶1.0g在50℃、500r下搅拌30分钟溶解,测定溶液的为5~6,呈微酸性。
(c)在上述(b)中添加羧甲基纤维素,并一边搅拌溶解,一边测定其,直到为中性,此时加入的羧甲基纤维素为6.0g。
根据国家标准要求,并参考其他配方,综合改进,拟定的洗手液配方如下:
表3.1 洗手液配方
Tab3.1 Hand washing liquid formula
组分w/%十二烷基硫酸钠(SDS)6.6乙氧基化烷基硫酸钠(AES)3.4柠檬酸0.4柠檬酸钠2.4甘油(丙三醇)2.0迎春花提取液10.0羧甲基纤维素6.0琼胶1.0水70.2
(2)配置
根据上述配方配置洗手液:
(a)取上述配好的=6的缓冲溶液50mL于200mL的烧杯中,先将羧甲基纤维素和琼胶加入烧杯中,在50℃恒温磁力搅拌器上加热30分钟,并用500的转速搅拌使其溶解,并调节其粘度;
(b)测定上述溶液的,并用柠檬酸和柠檬酸钠调节其为6~7;
(c)将上述配方中的其他原料依次加入烧杯中,并稀释溶液至100mL,调节1000,搅拌2小时,使其充分混合均匀;
(d)超声30分钟,静置陈化一天,使体系自均衡。
3.2 总活性物含量
根据配方中所添加SDS和AES的含量可以得到该洗手液的总活性含量为10.0%。
2.5.4 抑菌性能的测定
将配置好的培养基分装在培养皿和平底培养瓶中,并封口包扎,贴上标签编号,在121℃的高压灭菌器中灭菌25min,灭菌后将试管摆成斜面使其凝固,在无菌的通风厨中,靠近火焰用接种针在试管斜面处接种大肠杆菌,接种曲线为波浪线型,在37℃的培养箱中培养24h。
将培养有大肠杆菌的试管中倒入无菌水,待大肠杆菌溶解在水中后将其倒入另一无菌的试管中,按10倍的系列梯度稀释即10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,再将培养皿依次编号为10-4、10-5、10-6各三套,一套标记为空白组(对照),另两套分别标记某品牌洗手液(A)和本文洗手液(B)为实验对照组,其中标记为某品牌洗手液(A)和本文洗手液(B)的培养皿中各加入一滴相应的洗手液,给这些编号了的培养皿依次接种,并用倒平板将其菌液均匀的分布在装有培养基的培养皿表面,在37℃的培养箱中培养48h后进行计数。
计数时,选择一组比较好的菌落,用平板菌落计数法进行菌落计数,并记录数据。
3.6 抑菌性能
选择稀释倍数为10-5的菌落计数:
左手拿培养皿,右手拿记号笔在培养皿上划分区域并记上标号,空白组(对)、某品牌洗手液(A)本文洗手液(B),如下图所示:根据上表可以看出,空白的培养基中的菌落数要比某品牌洗手液A和本文洗手液B多一倍,很明显,我们配置的洗手液比对照的活菌数少,说明我们的洗手液具有较好的抑菌效果。
2.5.3 的测定
用玻璃棒蘸取洗手液后,涂抹在pH试纸上,30后和比色卡对照,并记录其范围 。
2.5 产品性状性能检测
对已配置的洗手液进行泡沫高度、pH、粘度、重金属含量、微生物指标等性能的检测。
2.5.1 泡沫高度的测定
(1)用500ml容量瓶配制1/1000的洗手液溶液,取其溶液80ml,加入20ml的自来水;
(2)在100ml量筒中加入上述溶液50ml,塞住量筒口上下摇动三次,记下泡沫高度;
(3)重复上述步骤,测量3次,记录数据。
2.5.2 粘度的测定
(1)清理粘度计,调节两个水平调节脚,直至粘度计顶部的水泡在中央位置;
(2)将转子保护框架装在粘度计上(向右旋入装上,向左旋出卸下);
(3)将选用的转子旋入连接螺杆(
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