乳剂的研究进展.pdfVIP

乳剂用作基因给药载体 乳剂用作基因给药载体 乳剂用作基因给药载体 的研究进展 的研究进展 的研究进展 乳剂作为能量补充已有40多年的应 用历史，其因具有与脂质体相似的细胞 膜相容性，以及无毒、制备方法简易且 可通过使用添加剂使其表面携带阳离子 以增加细胞的转染率等特点已逐步发展 成为药物载体。 2002年，美国FDA批准含0.O5％环 抱菌素A的阴离子脂肪乳剂RestasisTM上 市，此举开创了乳剂作为药物载体在临 床上应用的先河。 2004年Bivas-Benita。 等成功地利用带正电阳离子乳剂包裹基 因给药，为非病毒载体的细胞转染指明 了新的研究方向。近年来，随着基因技 术的发展，乳剂作为基因给药载体受到 越来越多关注。 1.乳剂的分类及特点 1.乳剂的分类及特点 1.乳剂的分类及特点 根据乳滴大小，可将乳剂分为普通 型（粒径为200～500nm）和纳米型（粒 径小于100nm）；根据乳滴所带电荷的不 同，则可分为阴离子型和阳离子型。 普通乳剂常采用口服或静注等全身 给药方式；纳米乳剂虽制备工艺复杂， 但因粒径小、更易透过细胞膜而更多地 用于局部部膜给药。 阴离子乳剂通过带负电的乳化剂卵 磷脂、poIoxa-merl88、油酸等的作用， 使乳剂表面显示负电荷，乳滴与药物结 合的复合物因具有高的zeta负电位而得 以有效避免乳滴的聚集，从而具有较高 的稳定性，上述提及的RestasisT是阴离 子乳剂载体给药系统的一个典型代表。 但由于用于基因治疗的质粒DNA带有负电 荷，与细胞膜电行相斥，为提高细胞转 染率，基因递药的乳剂常选用带正电的 阳离子O/W型乳剂。 作为基因转染载体，带正电的阳离 子乳剂具有以下优点：①主要成分为无 毒的油和两亲性脂质，具有良好的生物 相容性；②可与带负电的DNA形成复合 物，保护目的基因不被机体中的某些酶 降解；③乳剂表面没有可被血液免疫细 胞及血清蛋白识别的物质，故与目的基 因结合生成的复合物在血液系统内相对 稳定；④复合物表面可被不同细胞的细 胞膜的脂质快速识别，具有较高的转染 效率。 2.带正电阳离子乳剂的组成 2.带正电阳离子乳剂的组成 2.带正电阳离子乳剂的组成 带正电阳离子乳剂的组成成分主要 包括水相、油相、乳化剂和附加剂。水 相和油相是乳剂的基本构成物质，起到 溶解药物的作用；乳化剂是防止油、水 分层的稳定剂；附加剂困带正电荷而具 有浓缩DNA和增加乳剂电荷的作用。制备 乳剂时常用的水相有注射用水、 PBS缓 冲液等，此处主要对油相、乳化剂、附 加剂加以介绍。 2.1油相 制备带正电的阳离子乳剂时常用的油相为 大豆油、亚麻子油、角鲨烯（squalene）、蓖 麻油、碘化油等。其中，大豆油、亚麻子油、 角鲨烯是传统乳剂制备中常用的材料，F。x等 对分别以这3种材料为油相、1，2-二油酸氧丙 基-N， N， N-三甲基漠化铰（DOTAP）为乳化 剂制备的阳离子乳剂进行了研究，结果显示， 以角鲨烯为油相时所得的阳离子乳剂-DNA复合 物粒径最小，zeta电位为50～65mV，其不但有 较高的转染效率，且无细胞毒性。 2.1油相 蓖麻油是制备纳米乳剂时最常用的 油相，其与乳化剂吐温80、二油酰磷脂 酰乙醇胺（DOPE）制得的阳离子乳剂与 DNA所形成的复合物的zeta电位为 +17mV，粒径大小为96nm，且粒径分布在 互个月内稳定。该复合物不但能抵抗脱 氧核糖核酸酶I（DNaseI）的降解，且有 较高的转染效率。 2.1油相 带正电阳离子乳剂-DNA复合物在血 清培养基中的浓度是影响基因转染效率 的重要因素：当复合物浓度高时，基因 的有效转染效率较高；但当其浓度低 时，因其密度小而不能在细胞表面形成 有效的沉淀浓度 2.1油相 故不能很好地与附着在培养基底部的细 胞接触，导致转染效率下降。Yoo等分别 以角鲨烯和碘化油（密度为 1.3 xl0- 3kg·m-3 “，其中碘