东北师范大学分析化学精品课.ppt

色谱分离中的四种情况如图所示： ① 柱效较高，△K(分配系数)较大,完全分离； ② △K不是很大，柱效较高，峰较窄，基本上分离； ③ 柱效较低，△K较大,但分离的不好； ④ △K小，柱效低，分离效果更差。 从以上看出，单独使用n和tR都不能说明问题，为了判断相邻两组分在色谱柱中的分离情况，在色谱分析中，引入分离度（R）这一概念。 2。分离度 分离度（R）：相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽度平均值之比。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响： 保留值之差──色谱过程的热力学因素； 区域宽度 ──色谱过程的动力学因素。 R=0.8：两峰的分离程度可达89%； R=1：分离程度98%，两峰能明显分离； R=1.5：达99.7%，两峰已完全分离，相邻两峰完全分离的标准。 3。色谱分离基本方程式 通过上式可从色谱图计算R，当没有体现处γ2，1与及neff的关系 。令Wb(1)=Wb(2)=Y（相邻两峰的峰底宽近似相等），引入相对保留值和塔板数，可导出下式： 将R与柱效能参数neff，选择性参数γ2，1联系起来，这就是色谱分离方程式。 可以继续推导： 表明R随体系的热力学性质（γ2，1和k）的改变而变化，也与色谱柱条件（n）有关。 例1：在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R=1.5 。计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm，柱长是多少？ 解： γ2，1 = 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 [γ2，1 / (γ2，1 —1) ]2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（块） L有效 = n有效·H有效 = 1547×0.1 = 155 cm 即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。 例2：在根长为1米的填充柱上，空气的保留时间为5s，苯和环己烷的保留时间分别为45s和49s，环己烷色谱峰峰底宽为5s。欲得到R＝1.2的分离度，有效理论塔板数应为多少？需要的柱长应为多少？ 解： 根据公式 可求neff=16×R2×[γ2，1/(γ2，1 —1)]2 =16×1.22×(1.1/0.1)2=2788 块 柱长L=neff×Heff，要求柱长，必须知道该柱的理论塔板高度Heff。该值应该与1m柱的理论塔板高度相等！ 因此，只要将1m柱的理论塔板高度求出即可。要求1m柱的塔板高度，要先求出1m柱的理论塔板数。 根据 可求1米色谱柱的neff＝16[(49-5)/5]2=1239 故所需柱长L为：L＝2788/1239×1m＝2.25m 第三节 气相色谱法 以气体作流动相，分气液和气固色谱两类 一、气相色谱仪器 流程图 1-载气钢瓶； 2-减压阀； 3-净化干燥管； 4-针形阀； 5-流量计； 6-压力表； 7-进样器； 8-色谱柱； 9-检测器； 10-放大器； 11-温度控制器； 12-记录仪 载气→减压→净化→稳压→ →色谱柱→检测器→记录仪 进样 气路系统、进样系统、分离系统、检测和记录系统、温度控制系统。 1、气路系统 包括气源、净化干燥管和载气流速控制。 要求： （1）密封性要好； （2）流速温度； （3）流量测量准确 A、载气：常用的载气有：氢气、氮气、氦气、氩气。一般用高压瓶贮装，选用何种载气，主要取决于选用的 检测器和其他一些具体因素。 B、气路结构： 单柱单气路 适用于恒温分析 双柱双气路 适用于程序升温 { C、净化器：除去载气中的水分、杂质 D、稳压恒流装置：稳压阀 2、进样系统 包括进样器及气化室。其作用是将液体或固体试样，在进入色谱柱前瞬间气化，快速定量地转入到色谱柱中。 进样器 气化室 为了让试样在气化室中瞬间气化而不被分解，要求气化室热容量大，无催化效应。为了减小柱前色谱峰变宽，气化室的死体积应尽可能小。 3、分离系统：色谱柱，色谱仪器的核心部件 填充柱：固定相充满整个柱子，U型或盘管型 毛细管柱：固定相涂在毛细管内壁上（中空） 4、温控系统：柱室、气化室的温度控制 试样必须以气体形式随载气进入色谱柱，而且在色谱柱中始终保持气体状态。 温度对分配系数、组分的扩散系数等都有一定的影响 方式：恒温法：空气恒温