临床化学的控制品和校准品.doc

临床化学的控制品和校准品 在自动分光系统上使用的罗氏诊断方法的标准化和对控制品定值 A. benozzi and H. Baier 德国Penzberg的Roche诊断公司的标准化和质量保证部，在临床化学标准化和对校准品与控制品的定值上有30多年的经验。以下我们介绍Roche诊断公司如何对相应产品进行定值（靶值设定）。 靶值设定：历史 在1970年的早期，仅有4个内部实验室进行靶值的设定。每个实验室在连续的4天内，用Eppendorf比色计对每个方法每天做双份测定。共收集了32个数据。取这些数据的算术均值设定为定值。 随着检验项目在临床化学实验室的增加，以及检验结果对患者疾病的诊断重要性的提高，对临床化学数据的质量即可靠性也越来越强调了。“结果的可靠性”即结果的精密度和准确度。 在70年代的末期和80年代的开始，在德国还没有对靶值设定的最佳模式达成一致。德国临床化学学会的中心参考学院（Central Reference Institution of the German Society for Clinical Chemistry）建议：由3个实验室对每个方法进行15次双份测定。同时，医学实验室的标准化和文件（Standardixation and Documentation in medical Laboratory, INSTAND）建议：每个方法由15个实验室进行5个单次测定。 这些引起了控制血清制备厂商的极大兴趣，德国诊断厂商协会（German Diagnostics Manufacturers Association, VDGH）提出一个高效而可靠的定值测定模式，吸取了各个模式的优点。“VDGH模式”要求每个方法至少由6个实验室做5个样品的测定。这个6×5=30结果模式还要求同时进行“未知控制品”的检测。只有负责靶值设定Roche诊断公司，知道“未知控制品”的定值。所有被评估的参加实验室必须能回收这个值。VDGH模式发表于1981年的J. Clin. Chem. Clin. Biochemistry, Vol. 19, pp. 1137-1179。它的基本原理仍然用于今天对每个靶值设定中。 欧洲的约30个实验室中，总的有7个（至少6个）近日参与靶值设定工作。 靶值设定：参加的实验室 为Roche诊断公司控制品和校准品确定定值的实验室，遵从法律上受委托的质量导则，所以完全符合专业实验室的规定。选择合适的实验室是定值质量的先决条件。 参加定值的实验室指标见表1。 为了确保实验室独立完成工作，Roche公司很少参与实验室为进行靶值设定的实施，并且确保所有数据的及时返回。 表1 外部实验室参与靶值设定的质量要求 组织机构 有明确的职责，有训练有素的检验人员 有明确的操作程序 检测仪器 有具体说明和注意保养 加样系统 加样器的校正（分析天平） 有控制图 样品处理 对冻干样品的复溶有具体说明， 对深低温冰冻样品的冻融有具体说明 内部QC系统 有QC图 室间QC系统 参加室间质量评估，有相应的反馈 方案 有合适的计算机系统，用于方案 储存 有合适的储存条件，对储存温度有记录和检查 实验室和Roche诊断公司的联系 有反馈，实验室主任参加会议，互相联系 靶值设定：程序 靶值设定的统计模式要求每个方法或项目至少有6个实验室参与。每个实验室对每个方法或项目进行3-5个独立系列的测定。所有校准品和控制品样品、以及其他检测的样品都是首次使用，仅在复溶或冻融时组合在一起的，这样的组合为独立系列。每次测定，都必须对检测系统做重校准。试剂不必新鲜配制。使用任何批号的自动系统校准品（C.f.a.s）进行校准。对试剂批号没有规定。 每一个批号的C.f.a.s.的校准值都可以溯源至厂商的一级校准品（Masterlot calibrator），而厂商的一级校准品可以溯源至参考品，这些参考品通常为国家的或国际标准（参见“标准化”）。 所有可接受的实验室结果的中位数被确定为靶值。中位数在所有结果中居中，即一半数据小于中位数，另一般数据大于中位数。所以中位数是按照数值大小的顺序确定的。离群点也不会影响中位数。因此，将中位数视为可靠值。 如果数据值是“同源、均相”的，进行中位数计算在生物统计学上是可行的。判断数据是否同源，应检查最大的实验室偏差，即最小实验室均值相对于最大实验室均值的百分偏差和不对称因子。 最大实验室偏差和不对称因子是实验值，取决于方法的天间和实验室间的精密度。不对称因子是所有结果分布曲线上较大部分和较小部分的比值，参见图2。 一般来说，最大实验室偏差小于10%，不对称因子小于2，属于可接受。 未知控制品（Blind Control） 未知控制品检测结果是否落在规定范围内，是确定检测结果可否用于统计评