IMAGING-PAM荧光成像仪简要操作手册.doc

荧光成像简要操作步骤 测定前请先仔细阅读说明书。 按照说明书，将所有连线正确连接 CCD相机与主控单元之间的Camera线。 MINI HEAD与主控单元之间的MINIHEAD线。 CCD相机与PC机之间的1394火线，另一端接计算机。 主控单元与PC机之间的USB连线。 主控单元与电池充电器之间的充电连线，另一端接电源。 打开主机和电源开关。 电脑上双击运行imagingWin.exe ，选择对应的“com”口。 在弹出的对话框中选择探头类型（mini）、选择颜色（blue）。 将被测材料放置好。 添加兴趣点（在窗口右侧的AOI区域，先单击Add，然后在叶片相应区域单击选定）可添加多个兴趣点，也可点击Reset全部清空，或Delete删除某个兴趣点。 选择窗口上部Setting选项卡，进行基本设置。通常需要设置几个（Act.Light）可根据需要设置光化光的强度，数字对应的光强在AL-List菜单中查看，一般选用植物生长时的光强。数字对应的实际光强可在菜单栏AL-List中查看。一些必须的设置依照仪器说明设置。（需注意ImageCorrection:大探头选择MAXI） 选择窗口上部Image选项卡，点窗口右侧下方的Measure Abs.按钮，测定吸光系数，应该是0.8左右。 10.测量量子产量Yield（△F/Fm，）光适应。 选择窗口上部Setting选项卡将Act Light中Width设置为10s 11.选择窗口上部Image选项卡，保证Ft 0.2，观察Mean值 0.2即可。若偏高，修改Setting中测量光参数Int和Gain值。 12.点窗口下方AL+Y，测定量子产量Yield（△F/Fm，）。 13.测量Fv/Fm，先将样品进行20m暗适应。 14.选择窗口上部Image选项卡，点窗口右侧下方的Measure Abs.按钮，测定吸光系数，应该是0.8左右. 15. 点窗口下方Fo，Fm；测量Fv/Fm。如果提示光饱和调整Setting中测量光参数Int和Gain值，保证Ft值在0.1－0.2之间。 以上9-15是测量Pam2100的光反应和暗适应。 以下为荧光诱导曲线测量和快速光响应曲线测量。 16．选择窗口上部Image选项卡，点窗口右侧下方的Measure Abs.按钮，测定吸光系数，应该是0.8左右。 17. 选择窗口上部Kinetic选项卡，单击窗口右侧的Start按钮，仪器开始测定荧光诱导曲线（持续约5min）。 18.选择保存图像。 保存路径、文件名、保存图像格式。 19.结束后，选择窗口上部Report选项卡，在窗口右侧选择需要的参数，点击窗口上部的导出数据按钮，将数据导出为csv文件（该文件可用ExceL打开），文件默认保存在ImagingPam\Data_MINI文件夹中。 20.选择窗口上部LightCurve选项卡，单击窗口右侧Start按钮，开始测定快速光响应曲线。（如弹出要求保存数据可根据需要保存。弹出是否保存之前的fofm对话框时，如果没有换叶片请选择是，如果更换了叶片则选择否，以测定新的fofm），光强编辑。 21.重复18，进行数据保存。 22.更换叶片，重新测量即可。 23.测定完成，关机。 Image界面：测量光、观测点、测量参数、吸光系数、 Kinetics界面： Light Curve界面： Report界面： Settings界面： 13step time设置为0到12步结束。