Agilent1100高效液相色谱仪操作规程-2017年10月.doc

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程 操作说明： 1.开机前准备： 1.1仪器设备： Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。 ● G1311A (四元泵)。 ● G1329A（标准型自动进样器）。 ● G1316A（柱温箱）。 ● G1315A（DAD检测器）。 ● 色谱柱 1.2溶剂准备： ● 有机相必须是色谱级纯。 ● 水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。 ● 流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。 产品类别 代表产品 品系 产品特点 纤维素酯类 混合纤维素膜（CN-CA） 水相 成孔性能好，亲水性好，材料成本低。可耐稀酸。不适合于酮类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。 聚酰胺类 尼龙6 （PA-6） 通用 具有亲水性，较耐碱不耐酸。在酮、酚、醚及高分子醇类不被腐蚀。 聚砜类 聚砜（PS） 通用 良好的化学和热稳定性，耐辐射，机械强度高。 聚偏氟乙烯/聚四氟乙烯膜 PDEF/PTFE 有机 PDEF耐化学腐蚀，耐氧化，耐高温，疏水性（酒精处理后变清水性），PTFE耐酸碱性强。 聚烯烃类 聚丙烯膜（PP） 有机 具有良好的化学稳定性，耐酸碱和各种有机溶剂。价格便宜，但孔径分布宽。 无机材料 陶瓷、玻璃BP、金属膜 通用 耐高温，耐有机溶剂、耐生物降解等。 2.基本操作步骤: (一)、开机： 1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。 2、打开 1200 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。 4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开冲洗阀。 7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。 8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。 9、点击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定” ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。 10、点击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵， 关闭冲洗阀。 11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：例如1.0ml/min。 12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积，点击“确定”。 13、点击“泵”图标，点击“泵辅助设定…”，设定“最流速梯度”，“最小冲程”，“压缩因子”，“主通道”。 （二）、数据采集方法编辑： 1、开始编辑完整方法： ● 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项，如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。 2、方法信息： ● 在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。 ● 点击 “确定”， 进入下一画面。 3、泵参数设定：（以四元泵为例） ● 在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 ● 点击“确定”，进入下一画面。 4、自动进样器参数设定:（以标准G1329A为例） ● 选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。 “标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。 “洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。 “使用进样器程序”---可以点击“编辑” 按钮进行进样程序编辑。 ●“最优化”有“无”，“重叠进样周期”和“预取进样瓶”，可以根据实际情况选择。 ● 点击进“确定”，进入下一画面。 5、柱温箱参数设定: ● 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它,点击“更多” 键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。 ● 点击“确定”，进入下一画面。 6、检测器参数设定: 6.1、VWD检测器 ● 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如0.1min(2s)。 ● 在“时间表” 中可以“插入”一行，输入随时间切换的