微生物生长和环境-7.pptVIP

7.1 微生物的生长 生长是细胞体积、内含物和细胞数目的增加，生长的外部表现为个体数量的增加和群体生物量的增长 繁殖是产生新一代的过程，是质变的过程，是生长的结果 一、获得纯培养的方法 3、选择性培养基的利用 不同菌对营养的要求 分离真菌，用马丁氏培养基，pH偏酸 分离放线菌，用高氏1号，pH中性偏碱 不同菌对化学试剂的敏感性 分离放线菌，培养基中加10%酚，抑制细菌、真菌 从土壤中分离真菌，加孟加拉红，抑制细菌生长 根据分离对象的代谢特征： 分离能发酵纤维素的菌株，培养基以纤维素为唯一碳源；分离固氮菌，用无氮培养基 二、细菌群体生长的测定 细菌的生长和繁殖难以分开，因此，常以群体生长作为细菌生长的指标 细菌群体生长测定一般采用细胞数量和生物量两种方法 （一）细胞数量的测定 细胞总数的测定（包括活的和已丧失活力的细菌） 1、显微直接计数法 2、比浊法 3、染色涂片计数法 活菌数量的测定 1、稀释平板测数法 2、最大概率法（MPN法） 3、浓缩法 （二）细胞生物量的测定 测定细胞干重法 单位体积培养物中细胞物质的干重 含氮量测定法 微生物细胞中蛋白质的含量是比较稳定的，测出微生物细胞中的含N量后再换算出蛋白质的含量，可用凯氏定N法 。 蛋白质的含量=氮量×6.25 DNA含量的测定 ATP含量的测定 代谢活性法 7.3 真菌的生长 丝状真菌在固体培养基上的生长 常以菌丝长度、菌落直径或面积来表示 真菌在液体培养基中的生长 以时间为横坐标，菌体干重为纵坐标，可绘出与细菌相似的曲线，区分为三个不同的生长阶段：延滞期、迅速生长期和衰退期 7.4 二次生长 、同步生长 在培养基中存在两种能为微生物利用的主要营养物时，微生物将首先利用其中较易利用的营养物开始生长，进入稳定期后经过短暂的适应后将利用第二种营养物再次开始新的对数生长并进入新的稳定期，表现为二阶式的双峰生长曲线 采用物理或化学的方法使培养微生物的生长处于相同的生长阶段并保持同时分裂的生长方式称为同步生长 7.5 连续培养 在一个恒定容积的流动系统中，一方面以一定的速度不断地加入新的培养基，另一方面以相同的速度流出培养物，这样可以使容器中微生物的数量和营养状态保持恒定，使微生物长期处于旺盛生长阶段 连续培养的方法有两类： 恒浊连续培养 恒化连续培养 恒浊连续培养 通过光电装置自动测定并籍以调节加入培养基的流速来保持培养物浊度，即菌数恒定的方法 恒化连续培养 通过控制培养液的流速来保持培养物的恒定生长速度和养料成分的培养方法 在培养需要一种低浓度的限制营养因子，通过调节其浓度的方法来获得具有不同生长速度的培养物，常用于模拟和研究微生物在自然状态养料稀薄下的生长规律 7.6 环境对微生物生长的影响 微生物的生活条件是环境因素的综合，只有各种因素配合适当时，微生物才能旺盛的生长发育，影响微生物生长的因子有： 根据微生物所适应的最适生长温度通常把微生物分为高温型、中温型和低温型 高温能杀死微生物，因此在微生物方法中常采用加热培养器皿和培养基方法灭菌 微生物的致死温度：在一定时间内（如10分钟）杀死微生物所需要的最低温度称为微生物的致死温度 微生物的致死时间：在一定温度下，杀死微生物所需要的时间；温度越高，致死时间越短 D值：在特定温度下使微生物菌数减少10倍所需的时间 灭菌：杀死所有微生物的方法，包括细菌的芽胞 消毒:杀死微生物的营养体，而不能杀死芽胞的方法 防腐：抑制微生物的生长，但并不杀死微生物的方法 化疗：杀死寄主内的病原菌的方法 低温对微生物的影响 在低温下，微生物的代谢活动降低，但原生质结构并不破坏，当提高温度后仍可恢复其正常生命活动；低于冰点的温度可使微生物死亡，主要是由于细胞中的水转变为冰晶，造成细胞的机械损伤和脱水。所以人们常用低温来保藏菌种，并用低温保藏食品不被微生物腐败 二、水份和渗透压 1、水份与干燥 水是微生物生活的必要条件，微生物生长所需要的水份用水活度来表示，即在一定的温度和压力条件下，溶液中的蒸汽压与纯水蒸汽压之比 2. 渗透压 一般微生物生长所适应的溶液渗透压在3～6大气压之间 微生物在等渗溶液中生长时，维持细胞形态不变（0.85~0.9%NaCl溶液） 微生物在高渗溶液中生长时，会出现质壁分离现象，严重时会引起细胞死亡；日常生活中常用高渗溶液（10－15％的盐