组氨酸激酶yycg在筛选肺炎链球菌抑制剂中的应用-生物通.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（３）：２５～２９ 组氨酸激酶（ＹｙｃＧ）在筛选肺炎 链球菌抑制剂中的应用 １ ２ １ １ １ １ １ ２ １ １ 李　南 　王　非 　牛司强 　王　虹 　李有强 　尹楠林 　张雪梅 　朱维良　尹一兵 　胥文春 （１重庆医科大学医学检验系临床生物化学教研室 临床检验诊断学教育部重点实验室　重庆　４０００１６） （２中国科学院上海药物研究所　上海　２０１２０３） 摘要　为了获得具有体外活性的肺炎链球菌组氨酸激酶ＹｙｃＧ并利用其筛选寻找新的抑制剂。 原核表达组氨酸激酶ＹｙｃＧ的激酶功能域，经ＳＤＳＰＡＧＥ，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定及镍层析柱纯化后，采 用激酶试剂盒检测其激酶活性；利用对其激酶活性的抑制作用从１０５种候选化合物中筛选有效的 抑制剂，并通过实验验证抑制剂的抗菌作用。原核表达得到约３５ｋＤａ的目的蛋白激酶域片段 ＹｙｃＧ′，其纯度达９５％，并具有体外水解ＡＴＰ的激酶活性；利用其活性筛选得到数种不