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中国畜牧兽医
两步同源重组法在大肠杆菌基因敲除中的应用
李 鑫李亚芯戴建君
南京农业大学动物医学院南京
摘 要基因敲除是研究基因功能最直接的方法对于大肠杆菌 而言传统的基因敲除
方法是利用其原有的 系统此方法依赖于特定的限制性内切酶酶切位点且所需同源臂长操作复杂
同源重组法的出现使得基因组的改造更为快速简单在 基因敲除中的应用也愈加广泛和成熟作者介绍
了 同源重组系统的组成和同源重组原理阐述了常用的两步同源重组法敲除 基因的操作步骤及注意事
项大肠杆菌的两步法基因敲除技术已在工程菌改造病原菌致病机理耐药机制研究等领域做出巨大贡献由于
两步法仍保留有 同源重组系统电转效率低有序列残留的缺陷作者对几个针对两步法的经典的无痕化改造
进行了总结介绍通过对以上方法及应用进行综述为以大肠杆菌作为工程菌的基因敲除技术提供参考
关键词大肠杆菌 同源重组基因敲除两步法
中图分类号 文献标识码 文章编号
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