酪氨酸激酶抑制剂高剂量脉冲式给药克服.pdfVIP

· 516 · 安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui 2016Apr；51(4) 网络 出版 时间：2016—3—88：29：01 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1065．R0829．026．html 酪氨酸激酶抑制剂高剂量脉冲式给药克服 tPd,细胞肺癌获得性耐药的体外观察研究 万宜涛 ，袁 媛 ，潘跃银 ，张 颖 摘要 目的 探讨吉非替尼高剂量脉冲式给药作用于非小 证实 3J，但耐药问题几乎不可避免 J。在初始对 细胞肺癌吉非替尼耐药细胞株 PC9／GR的抗肿瘤效应及其 吉非替尼敏感的患者，再次出现疾病进展后，予以 可能机制。方法 MTI法检测吉非替尼对 PC9／GR的增殖 TKIs高剂量脉冲式给药在一定程度上可延缓疾病 抑制率，计算半数抑制浓度 (IC卯)，根据Ic。值 ，分为吉非替 发展，同时对剂量增加伴随的不 良反应可很好地耐 尼常规剂量给药组和脉冲式剂量给药组，分别作用于 PC9／ 受 J。而减少吉非替尼剂量可能导致EGFR突变阳 GR细胞株，荧光显微镜观察各处理组中细胞凋亡形态学变 性者耐药规律的提前出现 J。但相关作用机制尚 化，流式细胞术检测细胞凋亡率 ，Westernblot法检测表皮生 未见报道。该研究以吉非替尼耐药细胞株PC9／GR 长因子受体 (EGFR)相关信号通路蛋白如p-EGFR、EGFR、磷 酸化的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶 (p-AKT)、AKT、磷酸化的细 为研究对象，观察吉非替尼不同给药方式对其的增 胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、ERK表达水平。结果 与对照 殖凋亡及相关EGFR信号通路变化情况，初步探讨 组比较 ，高剂量脉冲式给药组细胞凋亡率明显增加 (P 可能作用机制，为临床治疗提供理论依据。 0．01)，同时可明显下调p-EGFR、P．ERK、P—AKT蛋白表达 (P 1 材料与方法 0．05)。结论 吉非替尼高剂量脉冲式给药在一定程度上 可以显著抑制 PC9／GR细胞增殖，促进细胞凋亡，机制可能 1．1 材料 人NSCLCPC9／GR为广东省肺癌研究 与阻断EGFR信号通路传导有关。 所惠赠；吉非替尼为英国AstraZeneca公司惠赠，用 关键词 非小细胞肺癌；获得性耐药 ；吉非替尼 DMSO溶液稀释为母液 (终溶度为 10mmol／L)，在 中图分类号 R734．2 一 80℃冰箱冻存，待实验时再稀释至 目标溶度， 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2016)04—0516—05 DMSO的终溶度小于0．1％；胎牛血清、高糖 DMEM 培养基购 自美国Hyclone公司；青霉素、链霉素购 自 据 2014年我国肿瘤统计数据可知，肺癌发病 哈药集团；MTF粉、DMSO购 自美国Sigma公司；An． 率、死亡率分别为46．08／10万，37／10万，在肿瘤中 nexinV-FITC／PI细胞凋亡检测试剂盒购 自上海贝 排名第一 lJ。其中约 80％为非小细胞肺癌 (non— 博公司；