血液电泳检查课件.ppt

血液电泳检查 暨南大学附属第一医院 临床检验中心 曹 燕 一、概述 1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。 1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。 1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法，并首次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的。 1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法，对氨基酸的分离进行过研究。 1950年Durrum用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后，开创了利用各种固体物质（如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等）作为支持介质的区带电泳方法。 1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支 持介质，创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳，极大地提高 了电泳技术的分辨率，开创了近代电泳的新时代。 30多年来，聚丙烯酰胺凝胶电泳仍是生物化学和分子 生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用 最普遍，分辨率最高的分析鉴定技术，是检验生化 物质的最高纯度：即“电泳纯”（一维电泳一条带或 二维电泳一个点）的标准分析鉴定方法，至今仍被 人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的最后、最 准确的手段，即“Last Check”。 由80年代发展起来的新的毛细管电泳技术，是化学和 生化分析鉴定技术的重要新发展，己受到人们的充 分重视。 （二）电泳的原理： 电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。 在碱性环境中（PH8.6），蛋白质均带负电荷，在电场中均会向阳极泳动，因各种蛋白质的颗粒大小、等电点及所带的负电荷多少不同，它们在电场中的泳动速度也不同。 1 有助于临床疾病判断的参考 早期诊断、疗效观察、预后判断 2 电泳技术与免疫技术相结合，大大扩大了其临床应用的范围 3 电泳技术进行同工酶分析，提高诊断率 4 结合酶免疫标记抗体技术，检测脑脊液内寡克隆区带 5 利用固相抗原、抗体反应分离脂蛋白（a） 6 按分子量大小进行非浓缩尿蛋白电泳，区分尿蛋白类型，在无损伤的情况下，协助临床判断肾脏损伤的部位 ⑴ 纸电泳 （Paper electrophorisis） ⑵ 醋酸纤维薄膜电泳（Cellulose Acetate electrophoresis） ⑶ 琼脂凝胶电泳（Agar Gel electrophoresis） ⑷ 聚丙烯酰胺凝胶电泳（Polyacrylamide Gel electrophoresis）（PAGE） ⑸ SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）。 红细胞血红蛋白（运输氧的载体） 糖化血红蛋白 血 浆 清蛋白：分子量小，含量最多， 维持机体胶渗压；运载功能。 球蛋白：与机体防御功能密切相关； 也有运输功能。 纤维蛋白原：含量极少。 血红蛋白电泳 糖化血红蛋白电泳 血清蛋白电泳 非浓缩尿蛋白电泳 免疫固定电泳 脂蛋白电泳 酶电泳 脑脊液电泳 二、血红蛋白电泳 珠蛋白： 由四条多肽链组成。血红蛋白 亚铁血红素：由亚铁和原卟啉组成。 血红蛋白A 占97%， α2β2 珠蛋白 血红蛋白A 2 占2.5—3.5%， α2δ 2