、基因工程的基本操作程序.pptVIP

对构建基因表达载体的说明 1、形成重组DNA分子的过程中，必修用同一种限制酶切割目的基因和载体。 2、目的基因插入载体或者是插入受体细胞的染色体DNA中并不能说明基因工程操作成功，还要使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 3、目的基因在受体细胞中表达，产生相应性状的原因是不同生物共用一套遗传密码。 4、组成基因表达载体的四部分相互协作，缺一不可，共同维持目的基因的表达。 5、基因表达载体虽然都由四部分组成，但由于受体细胞不同（动物、植物、微生物），它们也是有差别的。 ③抗逆转基因植物 成果： A.利用调节细胞渗透压的基因，提高作物抗旱和抗盐碱能力； B.将鱼的抗冻蛋白基因转入番茄，提高番茄的抗冻能力。 C.将抗除草剂基因导入农作物中，在喷洒除草剂时，杀死杂草而不杀死农作物。 ④利用转基因改良农作物品质 A.将富含赖氨酸的蛋白质的编码基因导入玉米，获得的转基因玉米赖氨酸含量提高30％。 B.将控制番茄成熟的基因带入番茄，获得转基因延熟番茄，储存期可以达2个月。 C.将与植物花青素有关的基因导入矮牵牛中，转基因矮牵牛出现颜色变异。 2.动物基因工程前景广阔 ①用于提高动物生长速度 目的基因？举例说明 ②用于改善畜产品品质 举例说明 ③用转基因动物生产药物 如何操作？生产出哪些药物？ ④用转基因动物做器官移植的供体 如何操作？ ①用于提高动物生长速度 目的基因： 生长激素基因 例如： 将外源生长激素基因导入鲤鱼体内，9个月后转基因鲤鱼比对照组重1.5Kg。 转入生长激素基因的鱼（上）和同龄的鱼 肠乳糖酶基因 例如： 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使转基因奶牛中乳糖含量大大降低。 ②用于改善畜产品品质 目的基因： 药用蛋白基因 ③用转基因动物生产药物 目的基因： 过程： 获取目的基因 （药用蛋白基因） 构建基因表达载体 （药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子等调控组件重组） 显微注射 （哺乳动物受精卵中） 形成胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物 （只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达） 动物进入泌乳期 （分泌的乳汁中包含所需要的药物） 乳腺生物反应器： ③用转基因动物生产药物 指以转基因雌性动物个体的乳腺分泌乳汁来生产所需药品。 优点： 产量高 质量好 成本低 易提取 成果： 抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、α－抗胰蛋白酶 ④用转基因动物做器官移植的供体 供体动物： 猪 存在难题： 解决方法： 将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。 免疫排斥 （T细胞） 3. 基因工程药物 在传统的药品生产中，某些药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。 如胰岛素从生物胰腺中提取，干扰素从血液中提取。 传统生产方法的缺点 由于受原料来源的限制，数量少且价格十分昂贵。 可利用什么方法来解决上述问题？ 利用基因工程方法制造“工程菌”，可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低，价格昂贵，远不能满足社会需要。 1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。 基因工程药品 —— 胰岛素 3. 基因工程药物 干扰素是病毒侵入细胞后产生的一种糖蛋白。几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药。此外对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。 传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取出1mg干扰素。 基因工程药品 —— 干扰素 3. 基因工程药物 * 现代生物科技专题 1.2　基因工程的基本 　　操 作 程 序 灵台一中 徐改秀 ① 目的基因的获取 ② 基因表达载体的构建（核心） ③ 将目的基因导入受体细胞 ④ 目的基因的检测与鉴定 四 个 步 骤 一、目的基因的获取 (一)、目的基因主要是___________________ 编码蛋白质的基因 （二）、获取目的基因的常用方法 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 人工合成 1)基因文库？ 1. 从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库 2)基因文库的种类: 种类 基因组DNA文库：含有一种生物的全部基因 部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因， 如：cDNA文库 ①概念： PCR全称为_______________，是一项在生物____复制________