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2.1.植物细胞工程 §2.1.1.植物细胞工程的基本技术 植物组织培养技术的理论基础是什么? 1.植物细胞表现出全能性的条件有哪些? 4、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养? 胡萝卜的组织培养流程 根据上述过程,请同学们讨论归纳出组织培养的概念。 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 你知道吗?目前在植物组织培养中应用的培养基一般含有五类成分。请阅读以下相关材料,看看分别属于培养基的哪一成分: 材料1 一般用蒸馏水或去离子水配制培养基,煮沸过的自来水也可利用。 材料2 培养基中包括大量元素和微量元素。大量元素有N、P、K、S、Ca、Mg、Na等,微量元素有Mn、Zn、Cu、B、Mo、Fe等。 材料3 培养基中含有糖、维生素和氨基酸。糖为培养基提供所需要的碳源,并有调节渗透压的作用。常用的是质量分数为2%-4%的蔗糖,有时也加入葡萄糖和果糖等。一般来说,以蔗糖为碳源时,离体的双子叶植物的根长得较好;而以葡萄糖为碳源时,单子叶植物的根长得较好。植物能够利用的其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖,有的还能利用淀粉。维生素和氨基酸类主要有硫胺素(维生素B1)、吡哆素(维生素B6)、烟酸(维生素B3)、泛酸(维生素B5)以及甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺等。 材料4 有时加一些天然的有机物,如椰子乳、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽浸出物或番茄汁等。它们对愈伤组织的诱导和分化往往是有益的。 材料5 常用生长素和细胞分裂素,如2,4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等用于诱导细胞的分裂和根的分化。吲哚乙酸易被光和酶氧化分解,所以加入的浓度较高,常为1-30mg/L,萘乙酸、2,4-D的浓度则以0.1-2mg/L为宜。激动素、6-苄基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、玉米素等可以促进细胞分裂和诱导愈伤组织或器官分化不定芽,它们常用的浓度为0.01-1mg/L。在原代培养中,一般都需加入激素类物质,但随着继代培养次数的增加,加入量可逐代减少。离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。此外,赤霉素等对刺激培养细胞的伸长也具有一定的作用。 组织培养基的成分 脱分化和再分化的培养条件完全一样吗? 1、下列属于组织培养的是( ) A. 花药离体培养成单倍体植株 B. 芽发育成枝条 C. 根尖分生区发育成成熟区 D. 利用桑枝条扦插大田并发育成完整植株 2、有关全能性的表述中,不正确的是( ) A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体,因此全能性最高 B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达 C.卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能 性很高 D.植物细胞离体培养在一定条件下能表现出 全能性 1.你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么? 2.有没有一种温和的去壁方法呢? 3.两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关? 4、促进两个原生质体融合的方法有哪些? 5、可能出现几种原生质体融合的结果? 6.如果两个来源不同的原生质体发生了融合,融合完成的标志是什么? 7.如何将杂种细胞培育成杂种植株? 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 自然界有些具有重要经济价值的植物产生种子的过程非常困难,能否利用植物组织培养的原理获得具有正常发育能力的“人工种子”? 糖类作为主要能源物质, 维生素对生长分化有很好的促进作用 有机营养 对愈伤组织的诱导、分化往往有益 有机添加物 如促进细胞分裂, 诱导愈伤组织或器官分化 生长调节剂 水 无机营养物(大量元素、微量元素) 有机营养(碳源、氮源、维生素) 有机添加物 生长调节剂(生长素、细胞分裂素等) 固体培养基:添加琼脂 不完全一样 脱分化的过程不需要光照、 脱分化和再分化的过程中所用的激素种类和比例也可能有所不同等 ★ C ★ 番茄与马铃薯同属茄科植物,但不是同属的植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯的块茎生长在土壤中。 人们曾经有这样一个幻想:让一株植株地上部分结番茄,地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗? 因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 于是,这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交,来实现这一美妙的设想。 二、植物体细胞杂交技术 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么? 1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合,获得了第一个体细胞杂种。 1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次

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