不同剂量健腰密骨片对骨形成和小鼠骨髓间充质-上海中医药杂志.PDF

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不同剂量健腰密骨片对骨形成和小鼠骨髓间充质-上海中医药杂志

·72· 上海中医药杂志 2016年第50卷第7期 SH.J.TCMJul.,2016;Vol.50No.7 实验研究 DOI:10.16305/j.10071334.2016.07.023 不同剂量健腰密骨片对骨形成和小鼠骨髓间充质 干细胞中BMP7表达的影响 唐德志,杨 洲,笪巍伟,赵永见,姚长风,施 杞,王拥军 上海中医药大学附属龙华医院,上海中医药大学脊柱病研究所(上海 200032) 【摘要】 目的 探讨不同剂量健腰密骨片对小鼠椎体和骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcell,BMSCs)成骨分化过 程中骨形态发生蛋白7(bonemorphogenicprotein7,BMP7)表达的影响。方法 选取 1月龄昆明小鼠48只,雌雄各半,按体质量随 机分为健腰密骨片高、中、低剂量组及生理盐水4组,灌胃8周后取材。用MicroCT扫描分析L4腰椎,免疫组化染色观察不同剂量健 腰密骨片对椎体BMP7表达的影响;分离培养获得各组小鼠原代骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用碱性磷酸酶(ALP)染色、实时荧 光定量RTPCR法检测BMSCs成骨分化过程中BMP7的表达情况。结果 与生理盐水组比较,健腰密骨片高剂量组能够改善小鼠 椎体三维结构,促进椎体BMP7蛋白的表达;健腰密骨片高剂量组能够明显增加BMSCs中ALP活性,上调成骨基因BMP7mRNA的 表达量(P<0.05)。结论 健腰密骨片高剂量组能够明显提高小鼠椎体骨量,促进BMSCs成骨分化,上调椎体和BMSCs成骨分化过 程中BMP7表达,从而促进骨形成。 【关键词】 健腰密骨片;骨髓间充质干细胞;骨形态发生蛋白7;骨形成;中医药疗法 TheeffectofdifferentdoseJianYaoMiGutabletonmiceboneformationandBMP7Expressionof bonemarrowmesenchymalstemcells TANGDezhi,YANGZhou,DAWeiwei,ZHAOYongjian,YAOChangfeng,SHIQi,WANGYongjun LonghuaHospital,AffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai,200032 Abstract:Objective TostudytheeffectofdifferentdosesofJianYaoMiGutabletonmiceboneformationandBMP7expressionofbonemarrowmesemnchymal stemcells(BMSCs)inmiceduringtheosteogeneticdifferentiationprocess.Methods  Sixty1montholdKunmingmice,malethirtyandfemalethirty,were randomlydividedintofourgroupsofhighdose,middledose,lowdose,andsalinegroup.Allthemiceweretreatedintragastricallyandsacrificedafter8weeks. Thefourthlumbarvertebra(L4)wasscannedbyMicroCT,TheBMP7expressionofeachgroupwereobservedusingimmunohistochemicalstaining.Primarybone marrowderivedmesenchymalstemcells(BMSCs)wereisolatedandculturedineachgroup.Alkalinephosphatase(ALP)stainingwasperformedtoobservethe osteogenicdifferentiation,andrealtimequantitativePCRanalysiswasperformedtoobservethemRNAexpressionofBMP7.Results  Comparedtonormalsaline group,highdosegroupimprovedmicevertebralthreedimensionalstructure,increasedtheactivityofALP,promot

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