双向凝胶电泳一飞行时间质谱分析afb1诱发树鼩肝癌形成中蛋白质.docVIP

黄曲霉毒素B1（AFB1）与乙肝病毒（HBV）协同诱发树鼩肝癌形成过程中的差异表达蛋白质组研究 陈晓燕，谢丽，李山，代智，崔杰峰，康晓楠，苏建家，曹骥，欧超，李瑗，秦雪 【摘要】目的 比较黄曲霉毒素B1（AFB1）与乙肝病毒（HBV）协同诱发树鼩肝细胞癌生长不同阶段的蛋白质表达谱的改变，筛查在AFB1与HBV共同诱发的肝癌发生发展中起重要作用的关键蛋白质分子。方法 用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法（MALDI-TOF-MS/MS）对同一动物自身的癌发生前的肝组织（C45w），癌发生后的肝癌组织（CCa）及未经AFB1处理的对照组动物肝组织（E45w、E105w）进行了相互比较。结果 C45 w组、CCa组、E45 w、E105 w组分别平均检测到(1233±30)个蛋白点（n=3）， (1257±35)个蛋白点（n=3）， (1249±51)个蛋白点（n=3）和(1208±36)个蛋白点（n=3）。以各组中2-DE效果好、点数多的一块胶作为参考胶，分别进行两组间的匹配分析 (E45wvs. C45w，C45w vs. CCa，E45wvs. E105w)，筛选出两组之间差异大于或等于2倍的蛋白点65个。应用质谱鉴定出细胞色素C氧化酶等25种胶内差异蛋白质。结论 在AFB1与HBV共同诱发的树鼩肝癌发生发展不同阶段有明显的差异性蛋白表达谱，为进一步对人肝癌蛋白质组的研究提供了线索。 【关键词】：癌；肝细胞；树鼩科；蛋白质组学 基金项目：国家自然科学基金资助项目资助项目（）资助项目（）资助项目（）作者单位：530021 南宁，广西医科大学第一（陈晓燕、谢丽、李山、秦雪）；200032 上海，复旦大学附属中山医院肝癌研究所（代智、崔杰峰、康晓楠）；530021 南宁，广西肿瘤研究所（苏建家、曹骥、欧超、李瑗） 陈晓燕、谢丽对本论文有同样贡献陈晓燕通讯作者：秦雪，广西医科大学第一临床医学院检验系，530021，电子信箱：qinxue919@163.com李山，广西医科大学第一临床医学院检验系，530021，电子信箱：li@163.com Differentially expressed proteomics during hepatocarcinogenesis of tree shrew induced by aflatoxin B1 as detected by two-dimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF-MS/MS CHEN Xiao-yan*, XIE Li, LI Shan, DAI Zhi, CUI Jie-feng, KANG Xiao-nan, SU Jian-jia, CAO Ji, OU Chao, LI Yuan, QIN Xue Laboratory Department , the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning530021China. Corresponding author： QIN Xue, Email：qinxue919@163.com LI Shan, Email：lis8858@163.com 【Abstract】 Objective To comparatively study the differentially expressed protein-profiles during hepatocarcinogenesis of tree shrew induced by aflatoxin B1 (AFB1 ) and HBV, and to screen the responding proteins. Methods Tissues taken at different stages during the hepatocarcinogenesis such as pre-cancerous liver tissues(C45w),liver cancer tissues(CCa) and the liver tissues taken at the same stage from normal controls(E45w, E105w) were analysed through the methods of 2-DE and MALDI-TOF-MS/MS. Results Totally 1233±30 (n=3) spots were detected in the sample of C45w, 1257±35 (n=3) in CCa samples, 1249±51 in