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基因沉默与RNA干扰技术 RNA interference (RNAi) 2006 ：Silence is golden. Andrew Fire (left) and Craig Mello learned that theyd won the Nobel Prize for their groundbreaking discovery of RNAis gene-quelling power. 一、RNA interference 的发现 1995年，康奈尔大学的研究生Su Guo （郭苏）用 反义RNA 阻断线虫基因表达的试验中发现， 反义和正义RNA都阻断了基因的表达。结果 出乎意料。 1998年，卡耐基研究院 Andrew Fire 的研究证明， 在正义RNA也阻断了基因表达的试验中，真 正起作用的是微量双链RNA （污染）。是体 外转录正义RNA 时生成的。这种双链RNA对 基因表达的阻断作用被称为RNA干扰（RNA interference,RNAi ） Discovery of RNAi Nature 1998 391:806-811 Double-stranded RNA sense Neg. control Uninjected antisense inject C. elegans Antisense RNA dsRNA Mex-3 mRNA detection in embryos by in situ hybridization 早在1990年，Jorgensen等在研究如何增加 矮牵牛花的颜色时，观察到一种无法解释的现 象：通过添加过量色素基因拷贝来增加植物花 的着色，结果事与愿违，不但花未着色，反而 部分花变为白色。进一步的试验表明，这些导 入的基因不仅不表达，反而使植物本身的基因 表达也受到了抑制，即所谓的共抑制 （cosuppression）。 Phenomena first observed in petunia Attempted to overexpress chalone synthase (anthrocyanin pigment gene) in petunia. (trying to darken flower color) Caused the loss of pigment. An Unexpected Result Late 1980s, Rich Jorgenson and group chalone synthase for deeper purple petunias Got white and variegated Co-suppression: both endogenous and introduced genes silenced [Napoli e