奶牛α-1岩藻糖基转移酶基因的克隆表达-食品与生物技术学报.pdfVIP

研究论文研究论文 姚 晶 ，等 ： 奶 牛 α-1,3-岩藻糖基转移酶基因的克隆表达 奶牛α-1,3-岩藻糖基转移酶基因的克隆表达 ， ， 姚 晶 1 2 ， 张 阳旸 1 2 ， 吴正钧 1 ， 任 婧 *1 （1. 乳业生物技术国家重点实验室， 光明乳业股份有限公司技术中心， 上海 200436 ； 2. 上海海洋大学食品学 院，上海 201306 ） 摘要： 唾液酸化路易斯 X （ lewis x ， ） 是选择素家族的一个共同糖配体 ，通过与选择素 - sialyl Slex 竞争性地结合炎性细胞 ，可以抑制炎症反应 。克隆表达 Slex 合成过程中的关键酶 ，就 可以在体外 进行 的生物合成 ，从而进行相关生物制剂的开发 。 1， -岩藻糖基转移酶 （ - （ ， ） Slex α- 3 alpha 1 3 - ， ）就是参与 生物合成过程的关键酶之一 。 利用相关软件对牛的 基 因 fucosyltransferase FT Slex FT 进行了生物信息学的分析 ，了解了 FT 的相关理化性质 。 通过 PCR 的方法获得了 FT 基 因，构建 了重 组 质 粒 pMD19 -FT ， 并 亚 克 隆 至 表 达 载 体 pPIC9K 。 通 过 电转 化 将 线 性 化 的 表 达 质 粒 pPIC9K-FT 整合到宿主菌 Pichia pastoris GS115 基 因组上 ，构建 了重组酵母 GS115-FT 。 经诱导 表达后 ， PAGE 检 测到 了 目的蛋白质条带 ，证明 了此基因在 pastoris GS115 中能够 可溶性 SDS- P. 表达 。 关键词： 唾液酸化路易斯 ；牛 ； ， 岩藻糖基转移酶 ；克 隆 ；表达 -X α-1 3- 中图分类号： 786 文献标志码： 文章编号： — （ ） — — Q A 1673 1689 2014 03 0261 07 （ ， ） Clone and Expression of Alpha- 1 3 -Fucosyltransferase from Bos Taurus ， ， 1 2 1 2 1