核磁共振波谱仪NuclearMagnetic-药物分析.PPT

发展历史 1924年Pauli W.假设?特定的原子核具有自旋和磁矩，放入磁场中会产生能级分裂 1952年Standford大学的Bloch和Harvard大学的Purcell 独立证实了上述假设。获Nobel Prize 1956年，第一台NMR仪器?FT-NMR 1991年，Ernst 对高分辨核磁共振方法发展（获Nobel Prize） 2002年 （生物大分子的核磁分析） Nobel Prizes 1952年诺贝尔物理学奖授予美国加利福尼亚州斯坦福大学的布洛赫（Felix Bloch，1905—1983）和美国马萨诸塞州坎伯利基哈佛大学的珀塞尔（Edward Purcell，1912—1997），以表彰他们发展了核磁精密测量的新方法及由此所作的发现。 1991年R.R. 恩斯特（瑞士人）发明了傅里叶变换核磁共振分光法和二维核磁共振技术 2002年诺贝尔化学奖 授予瑞士科学家库尔特· 维特里希，发明了利用核磁共振技术测定溶液中生物大分子三维结构的方法 选择生物大分子中的质子(氢原子核)作为测量对象，连续测定所有相邻的两个质子之间的距离和方位，这些数据经计算机处理后就可形成生物大分子的三维结构图。 应用之 医学 磁共振成像（MRI）计算机断层摄影技术（CT） 三维空间多层面多方位的对人体内的病变及人体结构进行研究 1H-MRS（质子核磁共振波谱 ）用于检测体内多种微量代谢物 应用之 环保 控制柴油车尾气污染 安装环保引擎增效器 “所有物质都存在内部振动，包括在燃油中碳氢键” 节油和控制尾气污染 应用之 地质 核磁共振测井 利用弛豫时间可以计算重要的石油测井参数 应用之 合成 1H NMR 13C NMR 判断和鉴定有机合成物结构、构象，研究结构与性质的关系，给出合成物的谱峰归属及结构表征 利用谱峰的峰面积定量分析所测定基团的含量 利用化学位移差值研究电荷分布以及与定位效应的关系 进行有机合成过程分析和过程变化分析 药物分析与产品分析以及中间体质量控制 讨论: 驰豫过程:由激发态恢复到平衡态的过程 自旋晶格驰豫：核与环境进行能量交换。体系能量降低而逐渐趋于平衡。又称纵向驰豫。速率1/T1，T1为自旋晶格驰豫时间。 自旋自旋驰豫：自旋体系内部、核与核之间能量平均及消散。又称横向驰豫。体系的做能量不变，速率1/T2，T2为自旋自旋时间。 驰豫时间与谱线宽度的关系 ：即谱线宽度与驰豫时间成反比。 饱和：高能级的核不能回到低能级，则NMR信号消失的现象。 屏蔽效应化学位移的根源 化学位移的表示 ：单位ppm 常见的各种1H的化学位移如下： 叁键 ：键轴向为屏蔽区，其它为去屏蔽区。 羰基平面上下各有一个锥形的屏蔽区，其它方向（尤其是平面内）为去屏蔽区。 绝大多数氢键形成后，质子化学位移移向低场。 偶合常数 偶合常数——反映两核之间自旋偶合作用大小的量度，用J表示。 J常常等于两裂分峰之间的裂距，一般在20Hz以下。 偶合常数也是重要的结构信息。例如： (一) 连续波核磁共振波谱仪 解析实例 例1：C3H7Cl的NMR。 1．定量参数：峰面积或峰高。2．定量的特点：1）对于确定的核（质子），其信号强度与产生该信号的核（质子）的数目成正比，而与核的化学性质无关。2）利用内标法或相对比较法分析混合物中某一化合物时，无需该化合物的纯品作为对照标准。 3）峰很窄，远小于各化合物之间的化学位移的差值，因而混合物中不同组分的信号之间很少发生明显的重叠。4）方法简单快速、准确、专属性高，不破坏被测样品，可选择性的测定混合药物或药物制剂中的组分乃至药物的立体异构体。 3．测定方法：选择一个合适的峰作为测量峰。（1）内标法（绝对测量法） 内标法为NMR定量分析最常用的方法，它与GC的内标法相似，在样品溶液中，直接加入一定量内标物质后，NMR光谱测定，将样品指定基团上的质子引起的共振峰面积进行比较，当样品与内标均经精密称重时，则样品的绝对重量（Wu）可由下式求得： 13C-NMR的化学位移 内标：TMS。以其中的13C核的化学位移为标准。 变化范围：0－250ppm。 各种常见的13C核的化学位移如下： 13C-NMR的谱图 采取不同的去偶技术，可得到不同的13C-NMR图谱。常见的有宽带去偶谱、偏共振去偶谱、DEPT谱等。 下图是2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇的13C 的宽带去偶谱： 单键 (4)氢链 当分子形成氢键时．氢键中质子的信号明显地移向低磁场，使化学位移变大。一般认为是由于形成氢键时，质子周围的电于云密度降低所致。对于分子间形成的氢键，化学位移的改变与溶剂