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化 学 学 报 研究论文 Article ACTA CHIMICA SINICA DOI: 10.6023/ 电场方式对毛细管电泳分离DNA 的影响 陈进a 李振庆*,a,b 倪一a 刘晨晨a 窦晓鸣a,b 山口佳则a,c a ( 教育部光学仪器与系统工程研究中心 上海市现代光学系统重点实验室 上海理工大学光电信息与计算机工程学院 上海 200093) (b 上海交通大学物理系光学工程研究所 上海 200240) (c 大阪大学先进光子研究中心 大阪 565-0871) 摘要 以羟乙基纤维素为筛分介质, 在直流、方波脉冲、反向脉冲电场中对0.1～10.0 kbp 范围的DNA 样品进行分离, 改变脉冲电场调制深度, 探讨电场方式对毛细管电泳分离DNA 的影响. 研究发现, 其它实验条件一定时: (1)直流电场 下, 小片段DNA ( ＜1.0 kbp)可以被有效分离, 大片段DNA ( ＞1.0 kbp)迁移时几乎重叠在一起; (2)方波脉冲电场下, 增 大调制深度可提高大片段DNA ( ＞1.0 kbp)分离效果, 但降低了部分小片段DNA (0.6～1.0 kbp)的分离度; (3)反向脉冲 电场下, 可以实现0.1～8.0 kbp 范围内各个DNA 片段的有效分离, 改变调制深度会影响样本DNA 的分离时间. 并将 反向脉冲电场应用于毛细管电泳分离λ-DNA 的EcoT14 I/Bgl II 限制性内切酶酶切片段. 结果表明, 反向脉冲毛细管电 泳技术具有快速、准确、重复性高等特点, 可用于宽分子量范围DNA 片段分离. 关键词 毛细管电泳; DNA; 羟乙基纤维素; 脉冲电场; 直流电场 Effect of Electric Field Modes on the Separation Performance of DNA in Capillary Electrophoresis Chen, Jina Li, Zhenqing*,a,b Ni, Yia Liu, Chenchena Dou, Xiaominga,b Yamaguchi, Yoshinoria,c a ( Engineering Research Center of Optical Instrument and System, Ministry