玉屏风散对衰老模型小鼠皮肤郎格罕氏细胞超微结构-中国显微图像网.PDFVIP

玉屏风散对衰老模型小鼠皮肤郎格罕氏细胞超微结构的影响 马卓飞，张茂林 （湖北中医学院，湖北 武汉 430061） E-mail ：mazhuofei@126.com 摘 要： 目的：研究玉屏风散延缓小鼠皮肤衰老的作用机理。方法: 采用 D-半乳糖连续 6周颈 部皮下注射造成亚急性衰老小鼠模型，中药各剂量组注射 D-半乳糖同时灌服玉屏风散水煎剂， 并以 VitE-C组作为对照，电镜观察玉屏风散对衰老模型小鼠表皮郎格罕氏细胞超微结构变化的 影响。结果：衰老小鼠表皮郎格罕氏细胞会出现线粒体肿胀、空泡样变，内质网、Golgi复合体 肿胀等改变，玉屏风散能抑制这些改变。结论：玉屏风散可抑制衰老小鼠表皮郎格罕氏细胞超 微结构的改变，具有一定的延缓皮肤衰老的作用 关键词：玉屏风散 皮肤 衰老 郎格罕氏细胞 皮肤是人体最大的器官，具有独特免疫功能，皮肤衰老会引起皮肤免疫系统功能失调，而 与此同时皮肤免疫系统的功能失调又是导致或促进皮肤的衰老的原因之一[1] 。郎格罕氏细胞 (Langerhan’s cells Lcs )位于表皮，是皮肤免疫系统中重要的抗原提呈细胞，在免疫调节、免疫 监视、免疫耐受过程中起着重要的作用，郎格罕氏细胞功能的正常与否决定了皮肤免疫系统功 能[2] 。本文通过观察衰老模型小鼠表皮郎格罕氏细胞超微结构的变化，旨在探讨皮肤衰老过程 中郎格罕氏细胞超微结构的变化，及玉屏风散对其的影响。 1 材料和方法 1.1 动物 选用 3 月龄昆明种小鼠，雌雄各半,体重 20±2ｇ,由湖北医学科学院动物中心提供。 1.2 药物及试剂 玉屏风散, 由黄芪、白竹、防风组成，购自湖北中医学院专家门诊部，经水煮、过滤、浓缩， 配制成 100% （每毫升含生药1g）的水煎剂，装瓶，冷藏备用。维生素E （浙江医药股份有限公 司）、维生素 C （湖北华中制药公司）配成1%的混悬液，冷藏备用。Ｄ-半乳糖(上海试剂二厂)； 3%戊二醛；环氧丙烷；1：1 的环氧树脂 618；0.1%磷酸缓冲液。 1.3 方法 1.3.1 分组 小鼠正常喂养一周后，随机分为 5组:正常组、模型组、维生素 E-C 合剂组（以下简称西药 组）、玉屏风散大剂量组（以下简称大剂量组）、玉屏风散小剂量组（以下简称小剂量组）、每组 10 只。 1.3.2 造模及给药 模型组、西药组、大剂量组、小剂量组:每日颈部皮下注射 12.5%D-半乳糖（1000mg/Kg）， 连续六周。同时大剂量组每日灌胃玉屏风散水煎剂（18g/kg），小剂量组每日灌胃玉屏风散水煎 -1- 剂（9g/kg），西药组每日灌胃维生素 E-C 悬液（50mg/kg），连续六周。 1.4 观察指标 2 第 56 天末次给药前禁食 12h，给药 1h 后，小鼠背部脱毛，取背部正中皮肤约 1mm 大小的 皮肤组织,用3%戊二醛4。C 保存,制作电镜组织切片观察并照像。 2 结果 电镜观察发现，与正常小鼠比较，模型组小鼠郎格罕氏细胞形态结构发生了明显的变化。 正常组小鼠表皮郎格罕氏细胞胞膜完整，与周围细胞无桥粒结构，细胞核成分叶状，胞 质中不含角蛋白丝，有较多的线粒体，有发达的内质网，Golgi 复合体，丰富的核糖体，在胞质 凹陷附近中可见Birbeck 颗粒，呈杆状，中央有一细丝（如图 1、2 ）。 模型组郎格罕氏细胞细胞胞膜不完整，胞质内线粒体，肿胀、嵴变短、减少或消失,甚至形 成空泡，内质网，Golgi 复合体明显减少，内质网肿胀，空泡样变，Birbeck 颗粒量少等（如图 3 ）。 玉屏风散组及 VitE-C 组的郎格罕氏细胞细胞胞膜完整，细胞核成分叶状，胞质内虽可见线 粒体肿胀，脊排列稍乱，空泡样变，内质网肿胀，但程度较模型组明显减轻，内质网，Golgi 复 合体数量较模型组明显增多（如图 4、5、6）。 3 讨论