动物细胞工程(一课时).pptVIP

动物细胞工程 学习目标 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 细胞贴壁：培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖。 注：也有一些细胞（如淋巴细胞）能够持续在悬浮状态下生长 。 接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞（分装前的细胞培养）。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 （一）概念 动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核，移入到一个已经 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育成完整的动物个体。 利用核移植技术得到的动物称为 去掉细胞核的卵母细胞 克隆动物。 * 苍山四中高二生物备课组 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 自体皮肤移植 对大面积烧伤的病人来说：自体健康皮肤有限，他人皮肤来源不足，且会产生排斥反应。 如何才能获得大量的自体健康皮肤？ 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养? 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 原理：细胞增殖 简述动物细胞培养的 操作过程 分离组织（低幼动物） 分散细胞（胰蛋白酶） 原代培养（细胞增殖） 传代培养（细胞增殖） 分装 聚焦一、动物细胞培养过程 动物细胞生长特点： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 细胞贴壁过程 那么什么是接触抑制？ 接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 50代以后 失去接触抑制 接触抑制 动物细胞生长特性 部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。 资料：为什么贴壁的细胞会接触抑制？ 细胞膜上有糖类和蛋白质共同构成的糖蛋白,也叫做糖被,他在细胞上起识别作用. 当细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,这种现象就叫做接触抑制. 在相同条件下培养的癌细胞，由于没有糖被，对密度依赖性生长抑制失去敏感性，因而不会在形成单层时停止生长，而是相互堆积形成多层生长的聚集体,这种现象也说明恶性细胞的生长和分裂已经失去了控制，调节细胞正常生长和分裂的信号对于恶性细胞不再起作用。 传代培养的三个阶段 1、从首次传代到传至10代：容易传代，传代细胞正常的二倍体核型不会改变。 核型（染色体组型）：一个细胞内所有染色体的大小、形状和数量特性的汇总。 2、细胞传至10-50代左右时：细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。 3、10-50代之后：如果继续传代培养，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。 思考题： 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养 成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。 3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白、弹性蛋白等)。 4、细胞膜的主要成份是什么？ 蛋白质和磷脂 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 8、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 9、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 10、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎 样办？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接