基因工程及其应用-yqy.pptVIP

第2节 基因工程及其应用 三大重中之重高技术 生物技术（BT) 信息技术 新材料技术（纳米技术，NT） 生物技术的内容 基因工程技术 蛋白质工程技术 细胞（组织）工程技术 酶工程技术 发酵工程技术 从大肠杆菌说起 问题探讨 　 思考： 如何将重组DNA分子送入受体细胞呢？ 若载体对受体细胞有害会怎样？ 目的基因与运载体不结合可以吗？ 若载体没有切割位点将怎样？ 若目的基因导入受体细胞不能保存复制会怎样？ 若目的基因进入受体细胞，你如何去检测？ 基因工程的基本操作步骤： 中国已获准进入大田的转基因植物（1998.3) 转基因作物种植面积 E·coli DNA连接酶 只能“缝合”黏性末端 既可以“缝合”黏性末端又可以把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 T4 DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G (2)基因的针线：DNA连接酶 重组DNA分子 一、基因工程的基本工具 1）种类： 3）作用： 将双链DNA片断连接起来, （恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键）。 2）连接部位： 磷酸二酯键 【学习探究】 具备什么条件才能充当“运载体”呢？ 最常用的质粒——大肠杆菌的质粒 （1）在受体细胞中稳定存在，能自我复制 （2）有一个或多个切割位点 （3）有标记基因，便于筛选 （4）对受体细胞无害：质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。 1） 种类： 2） 作用： 噬菌体 动植物病毒 细菌细胞质的质粒（最常用）等 是用它做运载工具，将目的基因转运到受体细胞中去。 3） 作为运载体需要具备的条件 ①能与目的基因结合； ② 比较容易得到； ③ 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； ④具有多个限制酶切点； ⑤具有某些标记基因； ⑥对细胞无害 （3）、基因的运输工具——运载体 四步曲： 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 目的基因 （三）基因操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 直接分离基因 人工合成基因 目的基因的提取方法 （三）基因操作的基本步骤 步骤二：目的基因与运载体重组 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 （三）基因操作的基本步骤 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三：目的基因导入受体细胞 （三）基因操作的基本步骤 步骤四：目的基因的检测和表达 四环素 抗性基因 氨苄青霉 素抗性基因 检测：通过检测标记基因的有无，来判断目的基因是否导入。 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。 （三）基因操作的基本步骤 受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？ 若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。 表达：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达 二、基因工程的应用 　　运用基因工程技术，不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种，还可以培养出具有特殊用途的动、植物。 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 1、基因工程与作物育种 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 转基因龙胆花色奇异 转基因蓝猪耳改变花色 转基因牵牛花改变了花色 A：紫外光照射下的转绿色荧光蛋白的 Eustoma (Lisianthus) 花。 B：转没有绿色荧光蛋白的空质粒的花， 会发光的转基因鱼 导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 超级动物 特殊动物 图为2001年12月底出生的5只可爱的转基因克隆小猪。据培育者英国PPL医疗公司称，这些转基因小猪将为研究和“生产”适用于人体移植手术使用的动物器官提供巨大的帮助。 首只转基因猴诞生，人类未来忧喜参半 2、 2002年，中国转基因棉花