动物实验的基本技术与方法1.ppt

动物实验的基本技术与方法 介绍动物实验的基本手术过程 实验动物的编号﹑捉拿﹑固定方法 动物编号方法: 大动物多用挂牌法或用铝环固定在耳朵上，牌或环上有编号；羊或猪多用耳缺法，原则是左个右十，上三下一。 动物捉拿和固定方法 为了手术操作方便，顺利进行实验项目的观察记录，必须将动物麻醉和固定在特制的实验台上。 狗的捆绑与固定 捆绑前实验者应先对其轻柔抚摸，避免使其惊恐或激怒；用一条粗棉绳兜住上、下颌，在上颌处打一结，再绕回下颌打第二个结，然后将绳引向头后部，在颈项上打第三个结且在其上打一活结。 捆嘴后使其侧卧，一人固定其肢体，另一人注射麻醉药。应注意狗可能出现挣扎，甚至大小便俱下，以及由于这种捆绑动作往往致使狗呼吸急促，甚至屏气等问题。待动物进入到麻醉状态后，立即松捆，以防窒息。 狗的捆绑与固定的注意事项 用特制的狗头夹固定狗头：将狗舌拽出口外，避免堵塞气道。 将狗嘴伸入铁圈，再将直铁杆插入上、下颌之间，再下旋铁杆，使弯形铁条紧压犬的下颌（仰卧固定）或压在鼻梁上（俯卧固定）。再将狗头夹固定在手术台上。 猫的固定与捆绑 捉持猫时应戴手套，防止被其抓伤。先将猫关入特制的玻璃容器中，投入乙醚棉团对其进行快速麻醉，然后乘其未醒立即固定在猫袋或实验台上。 兔的固定与捆绑 捉持家兔时只须实验者和助手将其抓牢或按住即可。正确捉持方法为：一手抓住家兔颈背部皮肤，轻轻提起，另一手托住其臀部，使其呈坐位姿势。 兔可固定在兔盒或兔台上。做颈部手术时，可将一粗注射器筒垫于动物的项下，以抬高颈部，便于操作。兔的四肢固定和狗相同。 兔的抓取方法 小鼠、大鼠 实验者右手捉住小鼠尾，鼠会本能地向前爬行。 左手攥紧鼠颈背部皮肤，使其腹部向上，拉直躯干，并以左手小指和掌部夹住其尾固定在左手上。 可作腹腔麻醉。 用金属筒、有机玻璃筒或铁丝笼式固定器固定，露出尾部，作尾静脉注射。 大鼠抓取时注意事项 捉持大鼠的方法基本同小鼠。 大鼠在惊恐或激怒时会咬人，捉拿时可戴防护手套，或用厚布盖住鼠身作防护，握住整个身体，并固定头骨，防止被咬伤。 动作应轻柔，切忌粗暴。 再根据需要，将大鼠置于固定笼内或捆绑四肢。 小鼠、大鼠的抓取方法 豚鼠、蛙的固定抓取方法 豚鼠　右手横握豚鼠腹前部，左手轻托后肢。 实验者一手拇指、食指和中指控制蛙两前肢，无名指和小指压住两后肢。 实验手术的基本方法与步骤 动脉插管技术： 实验手术的基本方法与步骤 颈部神经分离技术 实验手术的基本方法与步骤 蛙类神经分离 实验手术的基本方法与步骤 鱼类动脉血管的插管部位与方法 悉生动物的概念 悉生动物（Gnotobiotic Animals）也称已知菌动物或已知菌丛动物（Anima with Known Bacterial Flora），是指用与无菌动物相同的方法取得饲养（剖腹取胎，在隔离器内饲养）、但明确的物体内所给予的已知微生物的动物，即凡含有已知的单菌（Monoxenie）、双菌（Dixenie）、三菌（Trixenie）或多菌（Polyxenie）的动物。 悉生动物的培养方法 一般是将1～3种已知的微生物人工接种于无菌动物体内定居，无菌动物接种一种已各菌就是单菌动物。 此种动物和无菌动物一样是放在无菌隔离器内饲养的，因此选用此种动物作实验准确性是很高的，可排除动物体内带有的各种不明确的微生物对实验结果的干扰，常用于研究微生物和宿主动物之间的关系，并可按研究目的来选择某种微生物。 悉生动物在生物医学研究中的应用 悉生动物应用在许多微生物学研究上是一个突出的例子。 选用悉生动物，才有可能了解到单一微生物和抗体之间的关系。 多种微生物存在于同一机体内，可以观察微生物与微生物之间及机体之间相互关系和菌群失调的现象。 各种动物特点比较 悉生动物的饲养管理 悉生动物和无菌动物一样，均饲养在无菌隔离器中，饲养管理方法也与无菌动物相同。 无菌动物饲养管理困难，且生活能力较差。 悉生动物应定期作微生物检查，一方面检查是否被污染，另方面检查接种的微生物是否定居。对未能定居的菌株还应补充接种。 实验动物体液采集方法 血样采集 小白鼠，大白鼠的尾静脉采血:对小白鼠，大白鼠的尾静脉采血时，将鼠固定，用酒精棉球对其尾部消毒。待酒精干后，从尾尖部向上数厘米处用拇指和食指抓住，与尾静脉成直角用安全剃刀切开，注射针刺入后即拔出或用剪刀剪断鼠尾采血。 小白鼠，大白鼠眼眶静脉丛采血:用乙醚将动物浅麻醉，采血眼眶向上固定体位。泪腺区域内，用特制采血器具（内径4~5mm的玻璃管加热后拉长至10~20mm，前端外径成1.4~1.8mm0向眼眶和眼球之间刺入，达到蝶骨深度，然后稍稍转动，达到一定深度血液就自动流出来了。 豚鼠的心脏采血 豚鼠固定后，胸部用酒精棉球消毒,用手指找出心脏搏动的位置，定位，从确定好的位置正中经左侧肋间进针，