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第%) 卷第 期 南京师大学报(自然科学版) WAB’ %) #A’
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%((+ 年) 月 a9Lb#=3 9 #=#a!#c #9bd=3 L#!WZb?!Xe(#HNSJHB ?@DEF@E ) ?E- ,%((+
猪!#! 在毕赤酵母中分泌表达条件
的优化及高密度发酵
$,% % , $,% % , $ % ,
蓝胜芝 ,于瑞嵩 ,俞明月 ,董世娟 ,曹祥荣 ,李震
($’ 南京师范大学生命科学学院,江苏 南京%$(()* )
(% ’ 上海市农业遗传育种重点实验室,上海%( $$(+ )
( ’ 上海市农业科学学院畜牧兽医研究所,上海%( $$(+ )
[摘要], 从发酵时间、接种量、-. 值、诱导剂量等方面对重组基因工程(毕赤酵母甲醇利用缓慢型)的摇瓶发
酵条件进行了优化,进一步探索了酵母菌表达猪!#! 的发酵工艺,包括种细胞密度对初始发酵期的影响,补加
甘油、甲醇速率条件的控制等’ 结果表明,摇瓶发酵时,诱导最佳时间为)+ / ,甲醇最适浓度为0 12 3 ,发酵-. 范
围为+4 5 6 )4 ( ,最适接种量% 7 $’ 在分批发酵、接种量为$( 8 且种子细胞光密度(9:+(( )为; 6 + 时,最有利于细
胞的高密度培养,在补料发酵时,根据溶氧控制甘油流加速率与时机,细胞干重达到$$04 *; 12 3 ,在50 / 重组猪
!#! 表达量达到$4 (5 12 3’
[关键词], 猪!#! ,毕赤酵母,摇瓶发酵,高密度发酵
[中图分类号])) ’ ), [文献标识码]= , [文章编号]$(($5+$+(%((+ )(((*+(;
!#$%’ () *+,-’’%() .()$%%()’ (/ 0(123! 4)$ 5%678$)’%9 2-:)4%()
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