柴胡皂甙d对人肝癌细胞BECN1表达及自噬功能的影响.pdfVIP

第38卷第 1期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．38No．1 2017年 1月 JournalofXi’anJiaotongUniversity (M edicalSciences) Jan．2O17 ◇ 中医药研究◇ 柴胡皂甙d对人肝癌细胞BECN1表达及 自噬功能的影响 肖 袜 ，任牡丹 ，卢桂芳 ，赵 艳。，张 丹 ，刘亚萍。，卢新兰 ，和水祥。 (西安交通大学第一 附属 医院：1．超声科 ；2．消化 内科 ，陕西西安 710061) 摘要：目的 观察柴胡皂甙 d(SSd)对肝癌细胞 SMMC一7721生长增殖及 自噬作用的影响，初步探讨其可能的机制 。 方法 肝癌 SMMC一7721细胞株经不 同终浓度 SSd(5．0、7．5、10．0、12．5、15．0、和 l7．5mg／L)作用 24、48、72h，MTT 法检测细胞增殖 ，筛选最适作用浓度及时间，RT—PCR测定 自噬基 因BEEN1mRNA表达水平 ，Westernblot检测 BEEN1蛋 白表达水平 。结果 SMMC一7721细胞增殖的抑制率随着 SSd浓度 的增大而增大 ，浓度达 12．5mg／L时 ，抑 制率最高 (60 )；SSd作用后 BEEN1在基因和蛋 白水平 的相对表达量 比对照组 明显升高(PO．05)，3一甲基腺嘌呤 (3一MA)可降低 BECN1基 因和蛋 白的表达 ，并可降低 SSd作用后的BECN1的表达 。结论 SSd对肝癌细胞 SMMC 7721增殖 的抑制作用呈现浓度和时间的依赖性 ，基本符合药物剂量 效应关系。SSd可能通过上调 自噬基 因BECN1 的表达诱导 自噬性死亡的发生 ，从而达到抑制肝癌细胞 SMMC一7721增殖的作用 。 关键词 ：柴胡皂甙 d；原发性肝癌 ；自噬；BECNl 中图分类号 ：R285．5 文献标志码 ：A D0I：lO．7652／jdyxb2017O1027 Theeffectsofsaikosaponin—don theexpressionofhuman hepatOceIlular carcinomacellBECN1andautophagicfunction XIAO Yi，REN Mu—dan ，LU Gui—fang。，ZHAO Yan ， ZHANG Dan ，LIU Ya—ping ，LU Xinlan ，HE Shuixiang。 (1．DepartmentofUltrasound，2．DepartmentofGastroenterolgy， theFirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710061，China) ABSTRACT：0bjective Toobservetheinfluenceofsaikosaponin．d(SSd)ontheproliferationandthefunction ofautophagyofhumanhepatocellularcarcinoma (HCC)celllineSM MC-7721toexplorethepossiblemechanisms． Methods SMMC一7721wasculturedinvitro andthentreatedwithSSdofvariousconcentrations(5．0，7．5，10．0， 12．5，15．0andl7．5mg／L)for24，48and72h．WeusedMTT todetectcellproliferation，selectedtheoptimal concentration and time，anddetectedtheexpressionsofBECN1atmRNA andprotein levelsbyPCR andW estern blot．R