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猪cfl2基因荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析
·14 · Animal Husbandry ＆ Veterinary Medicine 2013 Vol. 45 No. 12
猪 CFL2 基因荧光素酶报告基因载体的
构建及活性分析
*
， ， ，
王佳美 郎斌 朱弘焱 苏玉虹
( ， 121000)
辽宁医学院畜牧兽医学院 辽宁锦州
摘要: CFL2 ， PCＲ ， DNA CFL2 12
为了进一步深入研究猪 基因转录调控机制 通过 方法 从猪基因组 中获得 基因起始密码子上游 段逐步缺失的
CFL2 ， pGL4. 10 。 12 :pGL4. 10 －222 、pGL4. 10 －
启动子序列 分别定向克隆至含有荧光素酶报告基因的 载体上 构建了 种荧光素酶报告基因载体
383 、pGL4. 10 －482 、pGL4. 10 －666 、pGL4. 10 －912 、pGL4. 10 － 1021、pGL4. 10 － 1093 、pGL4. 10 － 1305 、pGL4. 10 － 1369 、pGL4. 10 － 1554 、pGL4. 10
－ 1680 、pGL4. 10 － 1826 。 pGL4. 74 ， C2C12 、 NIH3T3 、 HeLa ，48 h
以 为内参质粒 分别瞬时转染小鼠成肌细胞 小鼠成纤维细胞 人宫颈癌细胞 后采
－ － + － －
。 :pGL4. 10 1554 (1 502 ～ 51 bp) ， 1 502 ～ 1 317 bp
用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性 结果表明 的转录活性最强 初步证实 区
CFL2 ， CFL2 。
域为 启动子的活性区域 从而为进一步研究 的转录调控奠定了基础
关键词:启动子;CFL2 ;双荧光素酶报告基因
中图分类号:S852. 2 文献标志码:A 文章编号:0529 －5130 (2013)12 －0014 －05
Construction and activity analysis of the luciferase reporter vectors of pig
CFL2 promoter
*
WA
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