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环境工程中低温微生物应用 　　摘要：本文介绍了环境工程中低温微生物的应用原理和应用范围，对现有的环境工程中低温微生物的应用技术作出了分析阐述，有一定参考价值。 关键词：环境共成；低温微生物；应用 中图分类号：Q93文献标识码： A 文章编号： 1适冷微生物的适冷机理 1.1 膜的流动性 适冷微生物在低温条件下会产生更多的不饱和脂肪酸和支链脂肪酸，有利于脂类化合物中短链的形成、脂肪酸甲基分支的增加和环状脂肪酸比例的减少，进而增加微生物细胞内膜的流动性，促进适冷微生物的适冷性。然而，温度的增高会影响脂肪酸的产生，致使适冷微生物不耐高温。 1.2 DNA的转录和翻译 常温微生物在温度低于 15 ℃以下时，其 DNA 转录酶和翻译酶的活性降低，蛋白质有效折叠减少，DNA和 RNA 二次结构稳定性下降。而适冷微生物体内的核糖体提取物、RNA聚合酶、延伸因子和肽基-脯氨酰基的顺位异构在 0 ℃度左右具有活性，可保持蛋白质折叠率，核酸结合蛋白和 RNA 解旋酶的正常表达，可维持DNA 和 RNA 二次结构低温下的可变性。 1.3 冷适应酶 Weinstein 对 4 种不同适冷微生物（Desulfotalea、Psychrophila、Colwelliapsychrerythraea、Pseudoal－teromonas Haloplanktis TAC125） 进行了基因测序。 基因组中有冷冲击酶、不饱和脂肪酸化合物酶以及脂酸脱氢酶基因，减少类固醇控制膜流动性的基因。适冷微生物含有在低温下表达的过氧化氢酶基因和超氧化物歧化酶基因。微生物的酶分子内基团之间的相互作用减弱，酶和溶剂分子间的相互作用强化，从而使低温酶分子更具有柔性，强化了酶与底物的作用，降低了反应的活化能，提高了酶的催化活性。 1.4 冷适应蛋白 热应激蛋白质和冷应激蛋白质存在于诸如转录、翻译、蛋白质折叠等许多不同的细胞反应中，温度的变化会影响适冷微生物中热应激蛋白质和冷应激蛋白质的快速表达。常温微生物没有的冷适应蛋白(冷积累蛋白)，受低温冲击时不会产生冷应激蛋白，而适冷微生物会产生大量的冷应激蛋白。这种差异的产生可能是由于低温微生物细胞膜中的温度感知系统的感应造成的。 目前，Peter G 运用蛋白质组学方法已成功从适冷微生物中提取和鉴别了超过 30 种能在低温生境表达的蛋白质。4 ℃条件下，科研人员在 Methanococ－coides burtoni 中发现了能量代谢、转录和翻译过程涉及的蛋白质，此外Shewanella sp.中也鉴别出有辅胺酰基（蛋白质折叠中起作用的基团）的异构体，对冷适应微生物在低温下维持蛋白质活性有着重要作用。 1.5防冻蛋白和冷保护物质 Julseth 证实一种存在于南极湖的海洋单细胞细菌中存在防冻蛋白，含有丰富的钙离子，具有较高活性，通过合成抗冻糖蛋白或多肽，降低其体液或细胞水分的冰点。 实质上，防冻蛋白就是通过蛋白表面与冰晶结合产生热滞后现象，致使适冷微生物可以在低温下生长。海藻糖和胞外多糖也是适冷微生物体内重要的防冻物质，海藻糖可以阻止蛋白质变性和聚合，在抗结冰中起到依数性的作用；黏附在细胞表面水中的胞外多糖，可改变适冷微生物细胞内物化反应的环境，利于营养物质的停留和浓缩，维持胞外酶的活性并保护胞外酶不发生冷变性。 2 适冷微生物应用现状 2.1 冷适应酶的应用 由适冷微生物体内提取出的冷适应酶在生物技术中有着很好的应用前景，冷适应酶在低温下就有很好的催化效能，利用冷适应酶进行的生化反应无需热源及温度控制，同等耗能的情况下可得到更多地反应产物，节约能源。冷适应酶拥有高级别的立体特异性，使某些在高温下才能发生的反应在常温下也能实现。冷适应酶对时序过程也是有益的（如分子生物学），当需要在下一步反应没开始之前终止酶促反应时，热钝化比化学提取来得更容易而且更方便，热钝化终止反应的技术在水-有机溶剂混合相中发生的酶催化反应以及在以有机合成为目的的无水溶剂中发生的酶催化反应中都有应用。 果聚酶蔗糖酶、有机磷酸酶、β-葡糖苷酶、琼脂糖酶和果糖二磷酸醛缩酶的应用实例在文献中均可以找到。日本北海道民族工业学院的研究人员已经从寒冷土壤和水中分离出能产生冷适应酶的 Pseu－domonas.sp. PL-4和能产生冷适应脂肪酶的 Typhiciaishibariensis。 挪威的 ASA 公司在北海附近开拓了基地用以分离冷适应酶。提取出的酶包括虾碱性磷酸酶、尿嘧啶糖基化酶、鳕鱼胃蛋白酶、溶菌酶和一种从乌贼表皮中分离出的一种酶。欧盟第四框架研究项目赞助了一个检测来自南极洲的酶的项目，其中一些酶具有一定的商业潜力。这项工作研究的酶包括 α-