第十二章_细胞增殖及其调控(沈婷).ppt

第十二章  细胞增殖及其调控 细胞增殖是生命的基本特征，种族的繁衍、个体的发育、机体的修复等都离不开细胞增殖。一个受精卵发育为初生婴儿，细胞数目增至1012个，长至成年有1014个，而成人体内每秒钟仍有数百万新细胞产生，以补偿血细胞、小肠粘膜细胞和上皮细胞的衰老和死亡。细胞增殖是通过细胞周期（cell cycle）来实现的，而细胞周期的有序运行是通过相关基因的严格监视和调控来保证的。细胞无限制增长对个体来说意味着癌症，个体无限制繁殖对地球来说意味着灾难。一个大肠杆菌若按20分钟分裂一次，并保持这一速度，则两天即可超过地球的重量。 第一节 细胞周期概述 第二节 细胞分裂 第三节 细胞周期的调控 一、细胞周期 1．概述 ◆概念： 指细胞由一次分裂结束到下一次分裂结束所经 历一个有序的过程，是细胞进行物质积累与分裂的 循环过程。 ◆周期时相组成： 分裂间期（interphase）和分裂期 （Mphase）。分裂间期是细胞分裂前重要的物质准 备和积累阶段，分裂期则是细胞增殖的实施过程。 ◆划分四个时期： G1→S→G2→M，前三个时期合称分裂间期。S期进行DNA合成。 ◆根据增殖状况，细胞分类三类 周期中细胞：也称持续分裂细胞。具有持续分裂能 力的细胞，如造血细胞，上皮基底层细胞，植物分 生组织细胞等。 终端分化细胞：永久性失去了分裂能力不可逆地脱 离了细胞周期，但保持了生理活性机能。高度特 化，如哺乳动物的红细胞、神经细胞、多形性白细 胞、肌细胞等。 G0期细胞：也称静止期细胞。暂时脱离细胞周期。一 旦得到信号指使，会快速返回细胞周期重新进行细 胞分裂。如肝细胞。G0期细胞和终末分化细胞的界限 有时难以划分。 二、细胞周期中各个不同时相及其主要事件 G1期：子代细胞的生成标志着G1期的开始。与DNA合成启动相关，开始合成大量细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂类等，但不合成DNA同时染色质去凝集。 在G1期的晚期有一个检验点，监控着细胞是否进入S期。在芽殖酵母中叫做起始点(start)；在其他真核细胞中称为限制点(restriction point,R点)或检验点(checkpoint)。 S期，主要进行DNA的复制与核小体组蛋白的合成以及DNA复制所需的酶，并组装成染色质结构。微管蛋白也开始合成。其DNA复制的起始和复制过程受到多种细胞周期调节因素的严密调控。 G2期：在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子，此时DNA含量已增加1倍，细胞已做好了进入M期的准备。但也有一个检验点（ G2期检验点），监控着DNA是否完成了复制和损伤是否得到了修复。 G1 期：有丝分裂完成到ＤＮＡ复制之前的间隙时期。 S期：ＤＮＡ复制的时期。 G2 期：ＤＮＡ复制完成到有丝分裂开始之前的一段时期。 M期：细胞分裂开始到结束的这段时期。 G０期：有些处在细胞周期中的细胞会暂时脱离细胞周期停止细胞分裂而进入静止状态，当条件适宜时又可重新返回细胞周期进行细胞分裂，这种细胞成为G０期细胞，这个时期成为G０期。细胞周期中的细胞转变成G０期细胞多发生在G1 期。 三、细胞周期时间的测定 （一）脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法： 这种方法主要适用于细胞构成相对简单，细胞周 期时间相对较短，周期运转均匀的细胞群体。 优点：可同时测定细胞周期总时间和各时相时间 缺点：要求有同位素室，细胞还须同步化。 脉冲标记有丝分裂百分数法：对测定细胞进行 脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标 记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法 来测定细胞周期。 TG1：G1期的持续时间；TG2：G2期的持续时间 TS： S期的持续时间； TM： M期的持续时间 TC： 一个细胞周期的持续时间 PLM：标记的有丝分裂细胞所占的比例 TDR：胸腺嘧啶核苷，是DNA的特异前体，能被S期细胞摄入，而掺进 DNA中。通常使用的是3H或者14C标记的TDR。 （二）流式细胞仪测定法： 这种方法依据细胞各时期DNA含量的特征及其变 化来确定细胞周期时间。 优点：可测定各种细胞的周期时间，测定快 速，结果可靠。 缺点：要求有流式细胞仪。 （一）自然同步化 如：粘菌的多核体等。 某些水生动物的受精卵：如海胆、海参、两栖类。 增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 （二）人工同步化 1、选择同步化 1）有丝分裂选择法： M期细胞与培养皿的附着性低，振荡脱离器壁收集。 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 2）密度梯度离心法：