第七章 真核细胞内膜系统蛋白质分选与膜泡运输_.ppt

信号斑（signal patch）：亦称信号区，存在于完成折叠的蛋白质中，构成信号斑的信号序列之间（在一级结构上）可以不相邻，但通过折叠，形成一个在空间上相邻的三维结构，构成蛋白质分选的信号。 二、蛋白质分选的基本途径与类型 途径： 翻译后转运途径（后转移）：细胞质基质中完成合成的蛋白质。 共翻译转运途径（共转移）：转移到内质网上合成的蛋白质。 类型： 跨膜转运(transmembrane transport)：蛋白质通过跨膜通道进入目的地。如细胞质中合成的蛋白质通过线粒体上的转位因子（translocator）进入线粒体。 膜泡运输(vesicular transport)：被运输的物质在内质网或高尔基体中加工成衣被小泡，选择性地运输到靶细胞器。 选择性的门控转运(gated transport)：如通过核孔复合体的运输、通过胞间连丝的蛋白质转运。 细胞质基质中的蛋白质的转运：与细胞骨架系统密切相关。 A simplified “road map” of protein traffic 三、膜泡运输 细胞内膜系统之间的物质传递常常通过膜泡运输方式进行。各类运输泡之所以能够被准确地运到靶细胞器，主要取决于膜的表面识别特征。 大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。 衣被小泡在细胞内沿微管（或微丝）运输。 与膜泡运输有关的马达蛋白有3类，在这些马达蛋白的牵引下，可将膜泡运到特定的区域。 （一）衣被类型 已知的衣被有三类： ① 网格蛋白(clathrin)； ② COP I； ③ COP II。 衣被的主要作用： ①选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡； ②如同模具一样决定运输小泡的外部特征。 三种衣被小泡的功能 ε[epsilon]; ζ[zita]; Arf: ADP-ribosylation factor; Sar 1 1、网格蛋白衣被小泡 相关运输途径：质膜→内体，高尔基体→内体，高尔基体→溶酶体、植物液泡。 网格蛋白的结构：由3条重链和3条轻链组成包被结构单位——三脚蛋白复合体，形成一个具有3个曲臂形状的结构。许多网格蛋白的曲臂部分交织在一起，形成具有五边形网孔的笼子。 衔接蛋白(adaptin)：即接合素蛋白，介于网格蛋白与配体受体复合物之间，起连接作用。目前至少发现4种，分别结合不同类型的受体，形成不同性质的转运小泡。 adaptin 当网格蛋白衣被小泡形成时，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈围绕在芽的颈部，将小泡柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），从而导致膜融合，掐断（pinch off）衣被小泡。 2、COP I衣被小泡 功能：负责回收、转运内质网逃逸蛋白(escaped proteins)返回内质网，由7种蛋白组成。 回收信号：Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）。 内质网膜蛋白（如SRP受体）在C端有一个不同的回收信号Lys-Lys-X-X。 COP I还可以介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。 3、COPⅡ衣被小泡 介导从内质网到高尔基体的物质运输。 由多种蛋白质构成，Sar1GTP酶与Sec23/Sec24复合体结合在一起，Sec13/Sec31复合体覆盖在外层。 衣被小泡形成的部位，称为内质网出口位点（exit sites），该处没有核糖体。 大多数跨膜蛋白是直接结合在COP II衣被上，少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与COP II衣被结合。 分选信号位于跨膜蛋白胞质面的结构域，形式多样，有些包含双酸性基序[DE]X[DE] ，如Asp-X-Glu序列。 （二）衣被形成 衣被是在一类叫作衣被召集GTP酶（coat-recruitment GTPase）作用下形成的，为单体GTP酶（monomeric GTPase），即G蛋白。调节因子有：①鸟苷酸交换因子（guanine-nucleotide exchange factor, GEF）；②GTP酶激活蛋白（GTPase activating protein, GAP）。 衣被召集GTP酶包括 Arf 蛋白和 Sar1 蛋白。 Arf 参与高尔基体上网格蛋白衣被与COP I 衣被的形成。 Sar1 参与内质网上 COP II 衣被的形成。 衣被召集 GTP 酶存在于细胞质中，但处于结合 GDP 的失活状态。 内质网上形成COP II 衣被小泡时，Sar1释放 GDP，结合GTP 而激活。 激活的 Sar1 暴露出一条脂肪酸的尾巴，插入内质网膜，促进衣被蛋白的活化和组装，形成运输小泡。 活化的 Sar1 还可以激活磷脂酶 D（phospholipase D），将一些磷脂水解，使形成衣被的蛋白牢固地结合在