第六章 鱼类生殖内分泌学的研究进展.ppt

鱼类生殖内分泌学研究进展 ;二．诱导海水养殖鱼类繁殖的新技术 1．诱导海水鱼类性腺发育成熟和改善卵子质量 （1）脑—高活性GnRH-A； （2）垂体—鲤鱼脑垂体匀浆液或HCG； （3）性类固醇激素（T，E2）或其前体（雄烯二酮，ADSD） 应用：埋植MT和ADSD促进鳗鲡性腺发育成熟的作用 脑区GnRH升高，垂体和血清GTH升高，性激素升高，雄鳗4次、雌鳗8次埋植后即可成熟。;（4）必需脂肪酸（PUFA）对改善卵子质量和提高生殖能力起重要作用。 高不饱和脂肪酸促使卵黄蛋白原合成，加速卵母细胞发育成熟和提高卵子质量，产卵量提高，卵受精率、孵化率提高。雄激素生成、排精期延长、精液量增加。 22：6W3 ：20：5W3 ：20：4W6 eg 人工诱导成熟鳗鲡产出的卵子，W3、W6含量明显低于正常发育成熟的鱼类，所以认为，PUFA的欠缺可能是诱导鳗鲡较低受精率、孵化率和幼鱼成活??的主要原因之一。;2．诱导海水鱼类产卵、排卵 主要刺激因子是GnRH（神经内分泌因子）。分析3种GnRH（sGnRH ，cGnRH-Ⅱ，sbGnRH）及其类似物对条纹鲈垂体GTH释放的活性，表明cGnRH-Ⅱ及其类似物活性最强，但不如目前正推广使用的（D-Ala6 Pro9-LRH-A）。 哺乳类LRH-A的特点：能抵抗体内酶的降解作用，和受体有更强的亲和力。 LRH-A的缓释制品有两种类型：;非降解的埋植鱼体内的类型 用乙烯聚合物和LRH-A混合制成 的小丸，肌肉或腹腔埋植。 可降解的注射/埋植鱼体内的类型 用胆固醇、胆固醇-纤维素、聚合脂肪酸二聚体一葵二酸、DL-乳酸乙醇酸共聚物和LRH-A混合制成微球，肌肉或腹腔注射。用不同的缓释制品混合，缓慢释放，可持续30天以上---排精、排卵期延长。 ;LRH-A口服制品：将LRH-A，sGnRH-A、PIM、DOM、EDTA、胰蛋白酶抑制剂混合制成微囊----投喂鲶、鱒，24-48小时后，血液中GTH升高，4天内85-90%鱼排卵，5-10ug/kg为推荐剂量。 ;三．人为的“环境激素”对鱼类生殖的影响;四. 鱼类的性别决定和分化;4.1 性分化诱导假说; Witschi根据两栖类的研究资料，早在本世纪初就提出了性分化诱导假说，该假说认为：性腺皮质产生皮质素，髓质产生髓质素，性分化取决于这两种诱导物质的对比强度；若皮质素占优势则向雌性分化，反之就向雄性分化。关于诱导物质的本质，长期以来存在着两种对立的观点，一种观点认为诱导物质和成体性腺产生的类固醇为同一物质[8]，另一种观点认为性腺胚胎期的诱导物质可能是蛋白质或蛋白质与类固醇激素的结合体[9]。根据第一种观点，人们用雌雄激素分别处理鱼类，可诱导表型上出现雌性或雄性特征，说明在个体发育过程中，甾类激素可能是性分化过程的一个重要因素。 ;4.2 性染色体;4.2.1 XX/XY型;4.2.2 ZW/ZZ型;4.2.3 XO/XX型 ;4.2.4 ZO/ZZ型 ;4.2.5 复性染色体型;已研究过的鱼类性别染色体类型，大多属于XX/XY和ZW/ZZ型，约占已知者的70%。到目前为止,在所研究报道的鱼类中,具有异型配子的雄鱼至少是异型配子雌鱼的2倍。部分鱼类的性染色体类型见表1-1。; 最早使用外源激素诱发鱼类发生性转化的可能是Padao，但最早对鱼类性别决定机制系统阐述的是日本学者Yamamoto。他总结了性腺类型、雌雄同体现象、性别决定的遗传学基础以及性类固醇激素对性分化的影响，提出类固醇激素是自然的“性诱导剂”，雌激素是“雌性诱导剂”，而雄激素是“雄性诱导剂”。此后，应用激素诱导鱼类性转化的研究在各国广泛开展，在15个科47种鱼类中，对雌雄同体和雌雄异体鱼类（9科34种）采用外源激素诱导鱼类发生性转化已经得到了验证[12]。所使用的31种激素中，11种雄激素、12种雌激素为人工合成，只有5种雄激素、3种雌激素为自然激素，其中以17a-甲基睾酮（17α-MT）和17β-雌二醇（17β-E2）诱导效果最好。 ; 采用的方法有浸泡、投喂药饵、注射等。投喂药饵法是最常用的处理方法，即在饵料中拌和一定量的激素以投喂鱼类；浸泡法尤其适用于冷水性鱼类，在含有激素的水体中阶段性或持续性浸泡胚胎及开口摄食前的鱼，有时可达100%的性转化。但由于上述方法费工费时，且效果不稳定，所以近年国内外还采用注射或埋植缓释药物胶囊的方法，可有效诱导鱼类提早完成性转化，且操作简便，效果稳定可靠。在利用药物诱导鱼类性转化的研究中，都发现性转化过程中伴随着雌性激素和雄性激素明显的升高或降低。 ; 激素控制是人为控制鱼类性别的常见方法，用激素处