花粉的培养(笔记).ppt

第三章 植物主要组织培养方法;;思考：;本节内容;一、 植物花药（粉）培养的概念及意义; 在体细胞中只有配子染色体数目的个体称为单倍体。（2n → n） 1） eg: 正常个体 单倍体 水稻 2n＝2x＝24 n＝12 马铃薯 2n＝4x＝48 n＝24 小麦 2n＝6x＝42 n＝21 区别： 单倍体 一倍体;大大缩短育种周期。;;;;;3. 单倍体产生的途径; （1）自发形成的单倍体：（频率10 ～10 ） i、孤雌生殖：未受精卵细胞 单倍体 ii、孤雄生殖：eg： 金鱼草、烟草 iii、无融合生殖： 助细胞 单倍体 反足细胞 单倍体;; 在自然界，动物的孤雄生殖几乎是不存在的。主要是植物的孤雄生殖。; （2）人工诱导单倍体：;;;;;;花粉和花药培养;;明确几个概念;;;花粉母细胞 （小孢子母细胞） ;;;孢子体;;二、 培养材料的选取与制备;（一）材料选择; 确定取材时间 选择大致处于所需要花粉发育时期的花蕾。由于花粉发育时期和植株的某些外部形态特征之间的大致相关性，因此利用这些外部标志，选择符合条件的花蕾，经镜检确定花粉发育的准确时期。;;3. 生理状态的选择; 选取主穗（一级侧枝）的花蕾，因为一级侧枝的花蕾发育良好，数量大，发育同步。 操作过程中不应使花药受到损伤，若受损伤，则应淘汰，因为损伤常常会刺激花粉壁形成二倍体的愈伤组织。;低温预处理可以提高花粉胚的诱导频率 以1-5℃预低温处理小麦小穗，能提高花粉愈伤组织的产量。在4℃下冷冻石刁柏花蕾，预处理4天、8天和12天，愈伤组织诱导率比室温对照分别提高2.4倍、1.9和1.5倍。 各种植物要求预处理的温度和时间不同。;（三）外植体制备及接种;花药材料的选取 关键选取处于合适发育期的花药，离体培养后才能启动花粉发育。实践表明，从减数分裂期至双核期的花药，均有可能诱导离体孤雄发育。 大多数园艺植物的花药培养，成功率最高的时期为单核期，或单核中晚期。;;三、 花粉植株再生;;;;;;四、 单倍体植株鉴??和染色体加倍;鉴定方法;花药（粉）单倍体植株的染色体加倍;秋水仙素加倍方法（禾本科）;秋水仙素加倍方法（木本）;秋水仙素加倍方法（组培）;1.秋水仙素诱导多倍体形成的原因是：