芹菜素对雄性小鼠肝脏组织总抗氧化能力、还原型谷胱甘肽-氧化型谷胱甘肽值、丙二醛含量影响探究.docVIP

芹菜素对雄性小鼠肝脏组织总抗氧化能力、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽值、丙二醛含量影响探究 　　[摘要] 目的 观察不同剂量、不同作用时间芹菜素对雄性小鼠肝脏总抗氧化能力（T-AOC）、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽（GSH/GSSG）、丙二醛（MDA）含量的影响。 方法 200只成年SPF级昆明种雄性小鼠随机分为对照组（生理盐水10 mL/kg）、低剂量组（芹菜素 252 mg/kg）、中剂量组（芹菜素 504 mg/kg）和高剂量组（芹菜素1008 mg/kg）。连续灌胃7、14、21、28、35 d，分批处死，称取肝脏制备匀浆，测定T-AOC、GSH、GSSG及MDA含量。 结果 高剂量组T-AOC含量[（1.397±0.641）U/mg]显著低于对照组[（1.573±0.781）U/mg]（P = 0.000）；芹菜素灌胃28 d GSH/GSSG值相对对照组升高幅度最大（140.556%）；高剂量组灌胃21 d MDA含量[（1.068±0.729）nmol/mg]显著高于对照组[（0.354±0.212） nmol/mg]（P = 0.000）。 结论 1008 mg/kg芹菜素对小鼠肝脏组织T-AOC具有一定的抑制作用，并可增加肝脏脂质过氧化程度。T-AOC可以比较早地反映出机体抗氧化能力的变化。 [关键词] 芹菜素；总抗氧化能力；还原型谷胱甘肽；氧化型谷胱甘肽；丙二醛 [中图分类号] R992 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）06（c）-0007-03 芹菜素是天然存在的一种黄酮类化合物，广泛存在于多种水果、蔬菜、豆类和茶叶中[1]，具有抗氧化作用等多方面的生物学活性[2]。据报道芹菜素具有广泛的抗氧化作用。但隋海霞等[3]、Skibola等[4]体外研究结果显示，大剂量摄入黄酮类化合物，反而会使其成为致突变剂、促氧化剂，产生氧自由基而产生毒副作用。因此，对于芹菜素的抗氧化作用机制及有效剂量范围有必要进一步研究。本研究采用不同剂量芹菜素对成年雄性小鼠灌胃，在不同的观察时间点测定总抗氧化能力（T-AOC）、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽（GSH/GSSG）、丙二醛（MDA）含量，探讨芹菜素对肝脏抗氧化分子影响的剂量效应和时间效应，为芹菜素功效的深入研究及开发利用提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 实验动物及分组 成年健康SPF级昆明种雄性小鼠200只（动物合格证号编号为SCXK（甘） 2011-0001-0001067），饲养在甘肃中医学院中心实室的SPF级实验室内，按体重随机分为对照组（生理盐水10 mL/kg bw）、低剂量组（芹菜素252 mg/kg bw）、中剂量组（芹菜素504 mg/kg bw）和高剂量组（芹菜素1008 mg/kg bw），每组各50只。 1.2 试剂与仪器 芹菜素购于陕西惠科植物开发有限公司（生产批号：H，经HPLC检测，芹菜素纯度为98%，用蒸馏水配制成所需浓度。总抗氧化能力测定试剂盒（生产批号，总谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽测定试剂盒（生产批号和丙二醛测定试剂盒（生产批号均购自南京建成生物工程研究所。722型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），JA3003N 电子秤（上海精密科学仪器有限公司），LD4-2 离心机（北京医用离心机厂），DK-600S 型三用恒温水浴箱（上海精宏实验设备有限公司）。 1.3 方法 各组每天给予生理盐水或不同浓度的芹菜素灌胃1次，连续7、14、21、28、35 d。根据时间点分批处死动物，每批各10只，取出肝脏，称取0.2～0.4 g肝脏加入9倍体积的匀浆介质，研磨成匀浆，置于离心机内3000 r/min离心10 min，取上清液测定。T-AOC、总谷胱甘肽、GSH、GSSG、MDA含量及组织蛋白的检测均按试剂盒说明书操作。 1.4 统计学方法 使用SAS 9.1.3完成析因分析和方差分析[5-7]。计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示。首先通过GLM过程初步分析时间和剂量因素间是否存在交互作用。若存在交互作用，则控制其中一个因素在某个水平上，比较另一个因素各水平间的差异[6]；如不存在交互作用而存在剂量效应，则忽略时间因素，将不同时间同一剂量组的数据合并到该剂量组下再比较各剂量组间的差异；若不存在交互作用而存在时间效应，则忽略剂量因素，将同一时间的高、中、低三组合并为处理组，按照“变化幅度=（处理组-对照组）/对照组×100%” 计算并绘制处理组变化幅度随时间变化的曲线。以P 　　2.3 芹菜素对肝脏组织还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽影响