新 疆部分地区牛支原体的血清学调查及病原分离鉴定分析.pdfVIP

新疆部分地区牛支原体的血清学调查及 病原分离鉴定 摘要 为了初步了解牛支原体病的发生和感染情况。对235份牛血清用双抗体夹心ELISA 方法，进行了牛支原体病的抗体检测。结果显示，检出牛支原体阳性血清37份，阳性 率为15．7％。该结果表明，牛支原体病在调查地存在并且在部分地区感染率较高。 采集阳性血清对应的鼻拭子，用PPLO培养基培养，盲传3代，发现有“煎蛋样” 的菌落生长，挑取单个菌落再进行纯培养；纯培养物进行革兰氏染色，着色不良；姬姆 萨染色，呈淡紫色；狄氏鉴别染色，呈现深蓝色中心。初步怀疑分离菌为牛支原体。 对疑似牛支原体菌做进一步鉴定：生化反应鉴定：菌株对洋地黄皂苷敏感，发酵葡 萄糖，不水解尿素和精氨酸，结果显示该菌符合牛支原体的生化特性。PCR鉴定：采用 酚氯仿方法提取培养物的DNA，使用牛支原体16SrRNA通用引物进行PCR扩增，获 得预期310 bp大小的片段，该PCR扩增产物送测序公司测序，获得296 bp大小的片段，