CdTe量子点作探针共振瑞利散射法测定鲑精蛋白.docVIP

CdTe量子点作探针共振瑞利散射法测定鲑精蛋白 　　摘要：以巯基乙酸（thioglycolic acid，TGA）为稳定剂，在水相中合成水溶性的碲化镉量子点（CdTe QDs），采用荧光光谱、共振瑞利散射光谱法研究了CdTe QDs与鲑精蛋白（Salmine，Sal）的相互作用，研究结果表明：在pH= 8的弱碱条件下，带负电的CdTe QDs与带正电的Sal通过静电引力及疏水作用力结合，形成粒径较大的结合物，这种结合物的形成导致共振瑞利散射（RRS）显著增强，同时CdTe QDs的荧光猝灭，在优化的实验条件下，散射光强度（ΔI）与Sal浓度呈现良好的线性关系，线性范围为0.016～2.4 μg/mL，相关系数为0.9969，检出限为5.00 ng/mL，研究了最佳反应条件和共存物质的影响，据此建立了一种以CdTe QDs作探针，RRS法测定Sal的新方法，同时讨论了CdTe QDs与Sal作用机理。 关键词：CdTe QDs；鲑精蛋白；共振瑞利散射；荧光猝灭 中图分类号：O657.3文献标识码：A文章编号2013 1引言 量子点（quantum dots， QDs）又称半导体纳米晶（ semiconductor nanocrystal ），通常是由IIB-VIA族或IIIB-VA族原子构成的，粒径尺寸在1～10 nm之间的纳米颗粒，具有独特的物理和化学性质。最近几年以来，量子点被用作生物探针的研究备受国内外科研工作人员的广泛关注，目前研究较多的是CdX （X = S、Se、Te） QDs，最有前途的应用领域是在生物体系测定中作为荧光探针。相比于有机荧光分子，用QDs标记细胞、蛋白质和核酸等具有更好的荧光特性，它的相关应用研究，将促进超灵敏度、高稳定性以及长发光寿命的生物检测技术的发展[1]。 鲑精蛋白（Salmine，Sal）是鲑鱼精子中发现的一种鱼精蛋白，它是一种天然存在于鲑鱼成熟精细胞组织中、与DNA紧密结合在一起的一种32个氨基酸残基的阳离子肽，显强碱性，等电点为 12.1，其中精氨酸成分极高，近年来，Sal在医疗卫生和食品行业具有广阔的应用前景[2]，目前用CdTe QDs作探针共振瑞利散射法研究Sal的方法还未见报道[3]。 2材料与方法 2.1仪器与试剂 2.2TGA-CdTe QDs的合成 2.3测定方法 3结果与讨论 3.1CdTe QDs-Sal体系的RRS光谱 3.6.1分子体积增大 众所周知分子体积的增大直接影响到散射强度的提高[5]。在弱碱性的缓冲溶液中带正电的sal和带负电的巯基乙酸修饰的量子点通过静电引力和氢键结合在一起。随着聚集到量子点表面的sal的量增多而使量子点的表面带正电，这样量子点又结合另一个带有正电的量子点而最终导致量子点的聚集，导致分子体积的增大，RRS显著增强。 3.6.2CdTe QDs与鲑精蛋白共振增强散射效应 当Rayleigh 散射的波长位于分子的吸收带的附近时，散射强度将急剧增大，这种现象即为共振瑞利散射。由实验知，产生增强的瑞利散射效应。 3.6.3疏水性增强 反应前，带负电荷的CdTe QDs和带正电荷的鲑精蛋白均有较好的亲水性，它们在水溶液中易形成水合物，因而RRS均很微弱。而当CdTe QDs与鲑精蛋白结合后，形成的聚合物成电中性，导致疏水性增加，从而可能形成一种疏水的液—固界面与水形成一种固—液界面，这种界面的形成有利于RRS光谱增强 [6]。 3.7荧光猝灭的原因 在弱碱性条件下，带负电的CdTe QDs与带正电的鲑精蛋白通过静电引力及疏水作用力相互作用，导致QDs的荧光猝灭[7]。由CdTe QDs与鲑精蛋白相互作用的荧光光谱和RRS光谱得知，向CdTe QDs溶液中加入一定量的鲑精蛋白后，两者结合形成大的结合物，这种结合物使得QDs的荧光猝灭，同时伴随着发射峰位的红移。从紫外光谱图4也可以看出，鲑精蛋白与QDs之间存在着强烈的相互作用，结合后有新的吸收峰形成。由此可以说明，在pH值为8的弱碱性条件下，带正电的鲑精蛋白与带负电的CdTe QDs通过静电引力及疏水作用力结合，形成不发光的结合物，导致QDs的荧光猝灭，其猝灭方式属于静态猝灭。 4结论 本文用巯基乙酸作为稳定剂，合成了水溶性TGA-CdTe QDs。在弱碱环境中，用巯基乙酸做稳定剂修饰的带负电的CdTe QDs与带正电的鲑精蛋白通过静电引力及疏水作用力结合，形成粒径较大的结合物，引起RRS光谱的显著增强和荧光的猝灭。在一定的条件下，RRS光谱的强度与鲑精蛋白的浓度呈现良好的线性关系。本文研究了鲑精蛋白和CdTe QDs相互作用的RRS光谱