Cr6+对蚕豆根尖细胞遗传毒性.docVIP

Cr6+对蚕豆根尖细胞遗传毒性 　　摘要：采用蚕豆（Vicia faba L.）根尖细胞微核试验研究了不同浓度的铬对蚕豆根尖细胞微核率和染色体畸变的影响，以此评价铬（Cr6+）的遗传毒性。结果表明，随铬浓度升高，蚕豆根尖细胞微核率先升后降，染色体畸变率升高。50 mg/L铬处理48 h微核率和100 mg/L铬处理48 h染色体畸变率达到最大值，达到最大值后随着铬浓度增加微核率下降，但仍高于对照，铬引起的染色体畸变以染色体断片、落后染色体和染色体桥为主。试验结果表明，铬能诱导蚕豆根尖细胞微核的产生和染色体畸变。 关键词：蚕豆（Vicia faba L.）；根尖细胞；铬（Cr6+）；遗传毒性；微核；染色体畸变 中图分类号：X826 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）23-5711-03 铬在自然界以六价态铬（Cr6+）存在时就变成了一种常见的危害人类健康的致癌物质。工业生产带来的Cr6+能够通过水、空气和食物进入人体，特别是通过土壤被蔬菜吸收后进入人体，逐渐累积。铬酸、重铬酸及其盐类对人的黏膜及皮肤有刺激和灼烧作用，长期接触会引发各种癌症[1]。Cr6+对DNA分子有损伤作用，使DNA丧失模板功能，引起不正常转录，还可引起DNA链损伤、断裂、构象改变，突变几率增加[2，3]。Cr6+对不同植物和动物的影响受到人们的重视。尽管有学者对全国一些地区Cr6+的毒害进行了研究，但在重庆涪陵这种重工业城市这方面的研究较少。为此，在重庆涪陵研究了不同浓度铬在梯度时间内对蚕豆根尖的胁迫作用，对该地区蚕豆种植的经济效益及人们的身体健康有着非常重要的作用。 染色体畸变是微核形成的主要原因，但是微核形成的原因是多元的[4]。微核主要是由细胞分裂过程中落后的染色体和染色体断片形成的。因此，微核率的高低可以反映遗传损伤的程度。本试验主要是对蚕豆微核和染色体畸变进行观察和统计，采用的是蚕豆根尖细胞微核技术，因该技术具有取材方便、培养简单、技术容易掌握等优点，已成为可以替代动物细胞体系检测环境污染物毒性的标准方法[5]。 1 材料与方法 选用重庆农户常种的蚕豆种子进行选种、消毒、浸种、催芽。用浓度分别为0（对照）、10、25、50、100 mg/L的Cr6+染毒液对蚕豆根染毒，分别培养6、12、24、48 h，再用去离子水恢复培养24 h后进行取材、固定、解离、染色、压片和观察。数据采用DPS 7.05和Excel进行处理。 微核率是指观察的微核数占视野中观察的细胞总数的比例；染色体总畸变率是染色体总畸变细胞数占有丝分裂细胞数的比例。 2 结果与分析 2.1 Cr6+对蚕豆根尖细胞微核率的影响 由表1可知，处理6 h的在50 mg/L时微核率达到最大值（16.95‰），处理12 h的在50 mg/L时微核率达到最大值（17.57‰），处理24 h的在25 mg/L时微核率达到最大值（21.59‰），处理48 h的在50 mg/L时微核率达到最大值。在4个时间段内的微核率都是随着Cr6+浓度的增加先增加后下降，且Cr6+浓度为10～100 mg/L时微核率都显著高于对照，但Cr6+浓度为100 mg/L时的微核率低于10～50 mg/L时的微核率，其原因可能是Cr6+浓度过高对细胞的损伤程度增加，导致微核形成减少[6]。 2.2 Cr6+对蚕豆根尖细胞染色体畸变率的影响 表2结果表明，总体上染色体畸变细胞的数量随染毒时间和Cr6+浓度的增加而增加。染毒时间一定时，Cr6+的浓度与染色体畸变率呈正相关，在100 mg/L时达到最大值。当Cr6+的浓度一定时，染色体畸变率与染毒时间呈正相关，即染毒时间越长染色体畸变越明显，畸变细胞数目增加。 2.3 各个时间段Cr6+对染色体畸变类型的影响 2.3.1 染毒6 h时Cr6+对染色体畸变类型的影响 由图1可知，用Cr6+染毒6 h，蚕豆根尖细胞的染色体断片类型的畸变率在Cr6+浓度≤50 mg/L时随浓度的增加而增加，在Cr6+浓度为100 mg/L时略微下降，其余几种类型畸变染色体的畸变率随Cr6+浓度增加而增加。从处理1（0 mg/L的Cr6+）到处理5（100 mg/L的Cr6+）落后染色体类型的畸变率明显增加。 处理1染色体畸变主要是染色体断片，说明不用Cr6+处理时主要是染色体在分裂时断片。处理2染色体畸变也主要是染色体断片，但是落后染色体类型的畸变率较处理1明显增加。处理3中染色体断片类型的畸变率与处理2差别不大，但是落后染色体类型的畸变率有所增加。处理4染色体畸变主要是染色体断片，但是与处理3相比较落后染色体类型的畸变率增加幅度较大，说明处理4刺激染色体畸变中的落后染色体形成。处理