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分光光度法测定水中微量铁 黄 菊 分光光度法测定水中微量铁 1 实验目的 2 实验原理 3 仪器和试剂 4 实验步骤 5 思考与讨论 朗伯-比耳定律: A= lgIi/It = -lgT =?bc A--吸光度,表征物质对光吸收程度的量 Ii--入射光强 It--透射光强 T--透过率 ?--摩尔吸光系数 b--液层厚度（光程长度） c--被测物浓度  2）主要试剂 （1）配制溶液 （2）吸收曲线的绘制和测量波长的选择 （3）标准曲线的绘制 用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在选定波长（510nm）下，测定1-5号标准溶液的吸光度。以铁标准液浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-c标准曲线。 （4）未知试样中铁含量的测定 在与标准溶液相同的条件下测定未知试样的吸光度，根据吸光度A值从标准曲线上查得未知液中铁的浓度。 谢谢！ * * 1 实验目的 1） 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 2）掌握分光光度计的仪器构造和使用方法。 2 实验原理 根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出A-c标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样中铁的含量。 2 实验原理 在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+。此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下： 2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。酸度太高，反应进行较慢；酸度太低则水解，影响显色。 3 仪器和试剂 1、2、5、10mL等 移液管 50、100、1000mL等 容量瓶 T6新世纪紫外可见分光光度计(含比色皿) 分光光度计 规格/型号 仪器 1）主要仪器 3 仪器和试剂 1 mol/L 乙酸钠 0.15 % 邻二氮菲 10 % 盐酸羟胺 10 ug/mL 铁标准液 配制浓度 试剂 光 源 吸收池 检测器 单色器 数据处理系统 1) 可见光区用玻璃吸收池（比色皿）； 2) 吸收池用于盛放分析试样，使用前用试液润洗2-3次；使用完毕后，立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净，并擦净水渍；比色皿透光面切勿直接用手接触，保持洁净，先用滤纸吸干、再用擦镜纸擦净外部液体； 仪器基本结构和使用注意事项 4 实验步骤 5 2 1 10 5 5 2 1 8 4 5 2 1 6 3 5 2 1 4 2 5 2 1 2 1 5 2 1 0 0 乙酸钠 （mL） 邻二氮菲（mL） 盐酸羟胺（mL） 铁标准液（mL） 序号 标准曲线作图区 标准曲线测定区 未知浓度试样测定区 标准曲线 参数区 样品池控制区 存在一个最大的吸收峰，该处吸光度为0.507，对应的吸收波长为510nm。 4 实验步骤 4 实验步骤 5 思考与讨论 1.本实验中哪些试剂应准确加入，哪些不必严格准确加入? 加入溶液的顺序能否颠倒？为什么? 2.加入乙酸钠的目的是什么? * * * * 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。