收缩反应的调控作用-中华危重病急救医学.PDFVIP

维普资讯 中国危重病急救医学 2007年 l1月第 19卷第 11期 ChinCritCareMed，Novembe! !! ．!! ： ·647 · · 论 著 · 缺氧诱导因子一1Q对缺氧所致血管平滑肌细胞 收缩反应的调控作用 张瑗 刘 良明 明佳 杨光 明 陈玮 【摘要】 目的 探讨缺氧诱导 因子一la(HIF—la)对缺氧所致血管平滑肌细胞 (VSMC)收缩反应的调控 作用及其相关机制。方法 实验分为正常组、缺氧组和给药组 (寡霉素，Oligomycin)。建立 Transwell内皮细 胞和平滑肌细胞双室联合共培养模型，分别于缺氧后不 同时间点 (0、0．5、1、2、3、4和6h)测定Transwell各下 腔荧光渗透率 以反映VSMC对去 甲肾上腺素 (NE)的收缩反应性 ；同时利用半定量逆转录一聚合酶链反应 (RT—PCR)分析HIF—la及其可能相关下游分子如内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOs)、环氧化酶一2(c0x一2)、血红素氧化酶一1(HO一1)的mRNA表达变化规律。结果 缺氧后VsMc对 NE的收缩反应性变化表现为双相变化 ：早期代偿性增高，于 0．5h达高峰，为正常组的 1．53倍 (尸0．01)； 至缺氧晚期则呈进行性降低，其 6h收缩性较正常组降低 3O (尸O．05)。寡霉素处理可完全抑制早期反应 性的升高趋势，其 0．5h收缩变化为缺氧组同时间点的38．3％，但可不同程度地提高晚期反应性，其 6h收 缩变化较缺氧组 同时间点增加 12．8 (尸O．05)。常氧状态下，联合培养内皮细胞和平滑肌细胞可稳定表达 HIF一1a及其相关分子 ，缺氧后 HIF—lamRNA表达显著增加 ，于 4～6h达到峰值 ，为正常组的 1．62倍 (尸O．01)。iNOS、COX一2及 HO一1的mRNA表达亦呈递增并表现为先后激活顺序 、分别于 2、3和 4h达 峰值 ，为正常组 的3．23、2．26和 2．86倍 (尸均0．01)；给药组则表现为各分子 的表达维持在正常范围 (尸均O．05)。结论 缺氧应激可引起 VSMC对 NE收缩反应性双相变化 ：即早期代偿性增高 ，晚期进行性 下降；阻断HIF一1a可 明显削弱该双相变化的幅度。HIF一1a可能通过对 eNOS、iNOS、COX一2及 HO一1的 选择性作用 ，在缺氧后 VSMC收缩反应性的双相变化中发挥重要作用 。 【关键词】 缺氧诱导 因子一la； 血管平滑肌细胞 ； 血管反应性 Regulatoryroleofhypoxiainduciblefactor—lo[in thechangesofcontraction ofvascularsmooth musclecell inducedbyhypoxia ZHANG Yuan，LlU Liang—uring，M lNG Jia，YANGGuang—uring，cHEN w ei．State KeyLaboratoryofTrauma，BurnsandCombinedInjury，TheSecondDepartmentofResearchInstituteof Surgery．Daping Hospital，TheThirdM ilitaryM edicalUniversity，Chongqing 400042，China Correspondingauthor： Liang—uring(Email：liuliangmingZOO2@yahoo．corn) [Abstract] Objective Toobservetheregulatoryroleandmechanism ofhypoxiainduciblefactor—la (HlF—la)inthecontractilechangesofvascularsmoothmusclecell(VSMC)inducedbyhypoxia．M ethods Cellsweredividedint~~threegroups：normal，hypoxiaandoligomycintreated