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桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用探究
桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用探究 [摘要] 目的 观察桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用,探讨其作用机制。 方法 各自分别取60只合格昆明小鼠,随机分为空白对照组、阿司匹林组(0.4 g/kg)、桂产藿香蓟乙醇提取物高、中、低剂量组,每组各12只。采用热板法、扭体法和甩尾法来观察桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用,并测定热板法小鼠血清丙二醛(MDA)、前列腺素E2(PGE2)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。 结果 ①与空白对照组比较,桂产藿香蓟乙醇提取物能显著提高热板法小鼠热刺激痛阈,在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期,差异均有统计学意义(P [Key words] Ethanol extract of Ageratum conyzoides.L.; Analgesic; Mechanism
藿香蓟属于菊科植物藿香蓟,又名胜红蓟、白花草、白花臭草、消炎草等,属一年生草本植物,多以全草或叶及嫩茎入药,传统药用功效为清热解毒、止血、止痛等,在亚洲、非洲、南美洲等地均广泛使用[1-2]。我国多分布于广东、广西、云南、贵州、四川、江西、福建等地,民间常用于治感冒发热、咽喉肿痛、疗疮湿疹、外伤出血、烧烫伤等[3]。本研究采用野生于广西田间荒地的桂产藿香蓟进行镇痛作用研究,旨在探讨其镇痛作用及机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 健康昆明种小鼠:体重(20±2)g;SPF级。动物许可证号:SCXK桂2009-0002,广西医科大学医学实验动物中心提供。
1.1.2 桂产藿香蓟乙醇提取物的制备 桂产藿香蓟地上部分阴干后粉碎,精确称取2 kg,加20倍量95%乙醇浸泡1 h后加热回流提取1 h,置冷后过滤,留置第1次滤液;药渣加10倍量95%乙醇,加热回流提取1 h,置冷后过滤,留置第2次滤液。合并2次滤液,减压回收乙醇,提取液减压浓缩,再分别配成实验所需的相应浓度的桂产藿香蓟乙醇提取物[4]。
1.1.3 药物、试剂及仪器 阿司匹林肠溶片,湖南新汇制药股份有限公司,批号121104;盐酸吗啡片,青海制药厂,批冰醋酸、甲醇、氢氧化钾均为分析纯;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供;GJ-8402型热板测痛仪,浙江宁海白石电子医药仪器厂。
1.2 方法
1.2.1 对小鼠热板实验的影响 将雌性小鼠放在水温调节到55℃的恒温水浴热板上,以小鼠舔后足的时间为痛阈指标。所有小鼠在给药之前均进行测痛,以痛阈值10~30 s为合格鼠。将合格小鼠60只随机分为5组:空白对照组、阿司匹林组(0.4 g/kg)、桂产藿香蓟乙醇提取物高、中、低剂量组(分别相当于生药6.0、3.0、1.5 g/kg),每组各12只。1次/d,连续灌胃给药7 d,末次给药后0.5、1、1.5、2 h各重复测定小鼠痛阈值,当痛阈值大于60 s时停止测试,按60 s记痛阈值。所有痛阈值测定结束后,立即行小鼠眼球取血,3500 r/min离心15 min,弃下层沉淀,留上清液。将上清液置于-20℃冰箱保存,随后按照试剂盒说明书的方法测定前列腺素E2(PGE2)、MDA的含量和SOD活性[5]。
1.2.2 对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响 另取一批小鼠60只,体重(20±2)g,雌雄各半,分组及给药同“1.2.1”项下。末次给药后1 h,每只小鼠腹部注射0.6%醋酸溶液0.2 mL,立即记录注射后15 min内各组小鼠的扭体反应次数,并计算扭体抑制率[6-7]。扭体抑制率(%)=[(空白对照组小鼠扭体均数-给药组小鼠扭体均数)/空白对照组小鼠扭体均数]×100%。
1.2.3 对甩尾法实验的影响 另取一批小鼠,将小鼠尾尖3 cm渗入(48.0±0.5)℃恒温水中,以小鼠第1次甩尾反应时间作为痛阈指标,所有小鼠在给药之前均进行测痛,以痛阈值10~30 s为合格鼠,共60只。随后分组及给药同“1.2.1项下”。末次给药后1 h,测定小鼠痛阈值,当痛阈值大于60 s时停止测试,按60 s记痛阈值[8]。
1.3 统计学方法
采用统计软件SPSS 13.0对数据进行分析,正态分布计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。以P 0.05)。本组给药前后比较,桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期(P 0.05)。见表1。
2.2 桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠血清PGE2、MDA含量及SOD活性的影响
与空白对照组比较,阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠血清PGE2
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