苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达-微生物学专业毕业论文.pdfVIP

苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达 第1页共27页 摘要 、 ／ 、f在大肠杆菌中，ppsA和pckA基因分别编码糖代谢中心途径的磷酸烯醇丙酮 因分别编码苯丙氨酸生物合成途径中的关键酶彩 本研究工作从大肠杆菌K12诱变菌株基因组中用PCR方法扩增得到了ppsA 和pckA基因，并人工合成了黄色短杆菌PBF启动子。在已经构建的含有aroG、 然后用电转化方法导入黄色短杆菌中进行酶活性检测和产酸发酵研究。结果表 明，ppsA和pckA基因的串联表达有利于苯丙氨酸生物合成途径下游产物的生成。 转化了pJN5质粒的菌株，其苯丙氨酸产量提高到了出发菌株的3．4倍，比携带 pJN3质粒的菌株提高了13％。 ～一 关键词 苯丙氨酸 矿 一 大肠杆菌 黄色短杆菌 一 一 复旦丈学撰写科学报告和学位论文专用纸 苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达 第2页共27页 Abstract Phosphoenolpyruvatesynthase(PpsA)andphosphoenolpyruvate carboxykinase (PckA)are to keyenzymesproducePhosphoenolpyruvate(PEP)，alimitingprecursor of the ofcarboncentermetabolism．InEscherichiacoli． L—phenylalanine．onpathway ale and and encoded 3 they by pckAgenesrespectively．Thegenes，aroG，pheA ppsA the on biosynthesis． tyrB，encodekeyenzymespathwayofphenylalanine Inthis and were from ofEscherichia work，ppsApckAgenes amplifiedgenome K12mutantstrain chain the of coli reaction，while PBF bypolymerase promoter Brevibacteriumwas ontheshuttlevector flavumartificiallysynthesized．Based pJN3 and and were tyrB PBF，ppsA containingaroG，pheA genes，thepromoter pckAgenes clonedinto inturntoconstructtheshuttlevector t