miR-216a通过靶向调控PKCα促进胃癌细胞凋亡的研究.pdfVIP

重庆 医学2013年 11月第42卷第 33期 4051 · 基础研究 · miR一216a通过靶 向调控 PKC 促进 胃癌细胞凋亡的研究 张雪梅 ，兰 辉 。，刘 方 ，邓 敏 ，梁晓秋 △ (1．怀化医学高等专科学校基础医学部 ，湖南怀化 418000；2．南华大学肿瘤研究所 ，湖南衡阳421001； 3．湖南省怀化市第三人民医院普外科 418000) 摘 要 ：目的 本文 旨在 明确 miR一216a是否通过靶 向调控 PKCa表达而抑制 胃癌细胞增殖和促进其凋亡，从而进一步揭示 miR一216a的抑瘤分子机制。方法 首先构建 PKCa3UTR-荧光素酶报告载体 ，通过荧光素酶报告检测观察 miR-216a对 PKCn 3uTR_荧光素酶活性的影响；将 miR-216a模拟物转染 胃癌细胞 MGC-803，采用Westernblot检测 PKCa蛋 白表达水平 ；将 PKCa siRNA转染 MGC-803，通过 MTS细胞增殖活性检测和 AnnexinV-FITC／PI凋亡实验考察PKCa下调对 MGC-803增殖和凋亡的 影响。结果 荧光素酶报告检测显示，miR-216a能特异性地与 PKCa3UTR结合 ，抑制其荧光素酶活性，下调 36 。过表达 miR-216a的MGC-803PKCa蛋 白表达水平降低。siRNA干扰 PKCa表达能抑制 MGC-803的增殖和侵袭能力，它能部分模拟 miR-216a的抑瘤功能。结论 miR-216a通过靶 向PKCamRNA3UTR而抑制 胃癌细胞增殖和侵袭能力。 关键词 ：胃肿瘤 ；细胞凋亡 ；miR一216a；PKCa doi：10．3969／i．issn．1671—8348．2013．33．030 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671—8348(2013)33—4051一O2 ThestudyofmiR-216ainducescellapoptosisby targetingPKCn ingastriccancer ZhangXuemei1,2，LanHui。，LiuFang ，DengM in ，LiangXiaoqiu (1．DepartmentofBasicalMedicine，HuaihuaMedicalCollege，Huaihua，Hunan418000，China； 2．CancerResearchInstitute，UniversityofSouthChina，Hengyang，Hunan421001，China； 3．DepartmentofGeneralSurgery，T^r PeoplesHospitalofHuaihuaCity，Huaihua，Hunan418000，,China) Abstract：Objective Toconfirm whethermiR-216asuppressescellproliferationandinducescellapoptosisbytargetingPKCa， thustorevealmolecularmechanism thatmiR一216afunctionsasatumorsuppressoringastriccancer．Methods PKCa3 untranslat— edregion(UTR)一lueiferasevectorwasconstructedand duaI_luciferasereportergeneassaywasemployed to examinetheeffectof miR一216aonluciferaseactivity．MGC-803cellsweretransfectedwithmiI 216amimics。andnextW esternblottingwasperformedto detecttheexpressionofPKCaprotein．TheeffectsofPKCadownregulationoncellproliferationandapoptosiswereobservedafter PKCa