秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合 study on the separation and fusion of protoplasts of main auricularia auricula cultivars in qinba mountains.pdfVIP
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秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合 study on the separation and fusion of protoplasts of main auricularia auricula cultivars in qinba mountains
秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合
陈文强1一, 王进1,邓百万1一, 彭浩1一, 解修超1一, 兰阿峰1一,
刘开辉1,一, 丁小维1,一, 赵娜娜1, 钱雪婷1, 苏晨曦1
(1.陕西理工学院生物科学与工程学院,陕西汉中723001;2.陕西省食药用菌工程技术研究中心,陕西汉中
723001)
摘要:采用单一变量法研究了黑木耳神农A8与秦单4#原生质体的制备、再生及融合的最佳条
件。培养7d的黑木耳茵丝体用0.5
mol/L甘露醇做稳渗剂,2.0mol/L的溶壁酶酶解,30℃下水
浴3.5
RM5再生培养基,神农A8和秦单4#原生质体再生率最高,分别为1.91%、1.53%;原生质体融合
的最佳条件为:使用30%聚乙二醇(PEG4000)和0.05mol/LCaCl,溶液(1)H10)为助融剂,35℃
融合30
min。通过荧光镜检和撷抗反应得到融合子,为黑木耳的遗传育种奠定理论基础。
关键词:黑木耳;原生质体;分离:融合:再生
920.1文献标志码:A
中图分类号:TQ 文章编号:1673—1689(2014)08—0856—09
onthe andFusionof ofMain
Study Separation PrOtoplasts
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A比矗c比如,.玩倪比矗c比如Cultivars Mountains
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K盔hu≯”,DlNGxi。0Ⅲe≯”, N讲t击, QlANxuetin毋,
of Scienceand of
(1.School
Biological Engineering,ShaarⅨiUniversityTechnology,Hanzhong723001,China;2.
Shaanxi ResearchCenterofEdibleandMedicated
Engineering Fung,Hanzhong723001,China)
variablemethodwasutilizedtodeterminethe 4M以cM2(矿in
Abst】’act:Single optimumconditionsof
(£MricM2n andfusionin A8and 4#. After
protoplastspreparation,regenerationShenlong Qindan
culturedfor7 4M以cM2(矿in删£ricM2n
d,the mvceliumwastreatedwith0.5mol/Lmannitolasosmotic
incubatedin30℃waterfor3.5 thetotal
stabilizer,digestedbv2.0%lywallzvme
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