秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合 study on the separation and fusion of protoplasts of main auricularia auricula cultivars in qinba mountains.pdfVIP

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秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合 study on the separation and fusion of protoplasts of main auricularia auricula cultivars in qinba mountains

秦巴山区黑木耳主要栽培种内原生质体分离与融合 陈文强1一, 王进1,邓百万1一, 彭浩1一, 解修超1一, 兰阿峰1一, 刘开辉1,一, 丁小维1,一, 赵娜娜1, 钱雪婷1, 苏晨曦1 (1.陕西理工学院生物科学与工程学院,陕西汉中723001;2.陕西省食药用菌工程技术研究中心,陕西汉中 723001) 摘要:采用单一变量法研究了黑木耳神农A8与秦单4#原生质体的制备、再生及融合的最佳条 件。培养7d的黑木耳茵丝体用0.5 mol/L甘露醇做稳渗剂,2.0mol/L的溶壁酶酶解,30℃下水 浴3.5 RM5再生培养基,神农A8和秦单4#原生质体再生率最高,分别为1.91%、1.53%;原生质体融合 的最佳条件为:使用30%聚乙二醇(PEG4000)和0.05mol/LCaCl,溶液(1)H10)为助融剂,35℃ 融合30 min。通过荧光镜检和撷抗反应得到融合子,为黑木耳的遗传育种奠定理论基础。 关键词:黑木耳;原生质体;分离:融合:再生 920.1文献标志码:A 中图分类号:TQ 文章编号:1673—1689(2014)08—0856—09 onthe andFusionof ofMain Study Separation PrOtoplasts in A比矗c比如,.玩倪比矗c比如Cultivars Mountains Qinba CHEN Wenqt(m窖”,WANG矗击,DENGBn泌耐。,PENGHd”,xIEx池chd3,LAN A知n毋”, LlU zHA0 SUChen%≯ K盔hu≯”,DlNGxi。0Ⅲe≯”, N讲t击, QlANxuetin毋, of Scienceand of (1.School Biological Engineering,ShaarⅨiUniversityTechnology,Hanzhong723001,China;2. Shaanxi ResearchCenterofEdibleandMedicated Engineering Fung,Hanzhong723001,China) variablemethodwasutilizedtodeterminethe 4M以cM2(矿in Abst】’act:Single optimumconditionsof (£MricM2n andfusionin A8and 4#. After protoplastspreparation,regenerationShenlong Qindan culturedfor7 4M以cM2(矿in删£ricM2n d,the mvceliumwastreatedwith0.5mol/Lmannitolasosmotic incubatedin30℃waterfor3.5 thetotal stabilizer,digestedbv2.0%lywallzvme

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