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DNA限制性核酸内切酶谱分析
实验二 DNA限制性核酸内切酶谱分析 ;a.识别序列具有特异性:4~6bp,具有回文结构;c.切口特征
平端
粘性末端
5’ 突出
3’ 突出;4.影响限制性内切酶活性的因素;产生星号活力的原因 ;E.酶的活性单位(1U):1小时内在50ul容积中降解1ugλDNA所需的酶量;二.操作:
1.样品DNA的限制性内切酶消化;37 ℃ 保温1个半小时后加6*loading buffer 5ul,取20ul上样电泳.
;酶切图谱:(λDNA,48.513Kb)
HindIII EcoRI
23.13 21.226
9.416 7.421
6.557 5.814
4.361 5.643
2.322 4.878
2.027 3.53
0.564
0.125;3.结果:
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