乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 gene cloning, expression and enzymatic characterization of acetyl xylan esterase.pdfVIP

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2017-11-18 发布于上海
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乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 gene cloning, expression and enzymatic characterization of acetyl xylan esterase.pdf

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乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 gene cloning, expression and enzymatic characterization of acetyl xylan esterase

乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究朱天地1，殷欣1，邬敏辰”，何瑶1，唐存多3 中英南阳洛桑昆虫生物学联合实验室，河南南阳473061) 摘要：乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O一乙酰基。消除木聚糖酶水解木聚糖时该基团产生的空间阻碍作用。以宇佐美曲霉(Aspergillus pPIC9K”-Auo．xe，Sal 甲醇诱导表达72 U／mL。发酵液经 h，获得了重组乙酰木聚糖酯酶(reAuAxe)，其酶活性为35．6 纯化获得电泳纯reAuAxe。其表观相对分子质量约为3．4x104，比酶活性为390．5 U／mg。纯化后 4．5～7．0范 reAuAxe的最适反应温度为50℃，在45℃及以下稳定；其最适反应pH为6．0，在pH 围内稳定：所测的多数金属离子及EDTA对其酶活性影响不大。关键词：宇佐美曲霉；乙酰木聚糖酯酶；基因克隆；表达；酶学性质中图分类号：Q556．1文献标志码：A 文章编号：1673一1689(2014)10—1084一06 Gene and Characterization Cloning，ExpressionEnzymatic of Esterase AcetylXylan ZHU Cundu03 Tiandi‘，y，ⅣXinl，形UMinchen吃，HEYa01，TANG of Medical (I．School 214122，China；2．Wuxi Biotechnology，JiangnanUniversity，Wuxi School，Jiangnan 214122，China；3．China—UK—NYNU—RResJoint ofInsect Normal University，Wuxi Laboratory Biology，Nanyang 47306 1，China) University，Nanyang locatedin esterase(Axe)canO-acetyl Abstract：Acetylxylan hydrolyze acetylatedxylan．Thus，the stefichindranceeffectsof canbeeliminatedwhen is this O-acetyl xylanhydroyzedbyxylanase．In mature an esterase(AuAXE)，was study，a peptidegene，A／zo．ze，encodingacetylxylan amplifiedby RT——PCR thetotalRNAfrom usamiiE001as techniqueusi