土壤中对甲虫有活性苏云金芽胞杆菌的筛选-氨基酸和生物资源.PDFVIP

氨基酸和生物资源 2014 ，36（1）：44~48 AminoAcidsBiotic Resources 土壤中对甲虫有活性苏云金芽胞杆菌的筛选 鞠守勇 （武汉职业技术学院生物工程学院，湖北武汉430074 ） 摘要：近几年来，甲虫已成为十字花科蔬菜的头号害虫。本文采集了湖北省各地区192份土壤样品，分离到苏云金芽 胞杆菌（简称Bt ）菌株74 株，以甲虫代表——黄粉虫为靶标昆虫筛选了15株典型Bt ，得到一株对甲虫有活性的Bt L 1 ；生物 测定该菌的半致死浓度（LC50 ）为221.20 μg ·g-1 ；聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）显示L 1至少具有3 个杀虫晶体蛋白；PCR cr 1Ac cr 1Aa cr 1Ia 扩增杀虫晶体蛋白基因，测序发现Bt L 1 中含有 y ，y ，y 基因，推测Bt L 1 中对甲虫活性的杀虫晶体蛋白基 因为cr 1Iay 。 关键词：苏云金芽胞杆菌；杀虫晶体蛋白；鞘翅目 中图分类号：Q 939.96 文献标识码：A 文章编号：1006-8376 （2014 ）01-0044-05 Isolation of Soil Bacillus thuringiensis Against Coleoptera JU Shouyong （SchoolofBioengineering，WuhanInstituteofTechnology，Wuhan430074，Hubei，China） Abstract ：In recent years ，the Coleoptera pest has become the biggest problem for the cruciferous vegetables. In this study ， the 192 soil samples were collected from different areas of Hubei province ，and 74 Bacillusthuringiensis strains were isolated. B. thuringiensis L 1 which had bipyramidal parasporal crystal ，could kill Tenebriomolitor，a typical representative of the Coleoptera. The LC50 was 221.20 μ·g-1. The SDSdisplayed at lease three crystal proteins. The Bt stain L1 had three or more insecticidal crystal genes cry1Ac，cry1Aa and cry1Ia identified by the PCR technique. According to the literatures ，the crystal protein which killed the Coleoptera was the Cry1Ia. Key words ：Bacillusthuriingiensis；insecticidalcrystalprotein；Coleoptera 鞘翅目（通称甲虫，Coleoptera）是昆虫纲中最大的 农药会导致黄曲条跳甲种产生抗性；同时化学农药 目，其中包括一些重要的农作物害虫，例如科罗拉多 施用后，会使蔬菜变黄，农药残留量增大，严重影响 马铃薯叶甲虫（Leptinotarsadecemlineata）、墨西哥棉铃 [4~6] 蔬菜品质 。因此采用无公害、低毒的生物农药替 象（Anthonomusgran